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細胞凋亡實驗科研實驗技術服務介紹
閱讀:91 發布時間:2024-9-27細胞凋亡實驗
一、實驗介紹:
細胞凋亡(apoptosis)一般是指機體細胞在發育過程中或在某些因素作用下,通過細胞內基因及其產物的調控而發生的一種程序性細胞死亡(programmed cell death)。細胞凋亡對胚胎發育及形態發生(morphogenesis)、組織內正常細胞群的穩定、機體的防御和免疫反應、疾病或中毒時引起的細胞損傷、老化、腫瘤的發生進展起著重要作用,并具有潛在的治療意義。
在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin是一類廣泛分布于真核細胞細胞漿內鈣離子依賴的磷脂結合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。將Annexin V進行熒光素(EGFP、FITC、APC)標記,以標記了的Annexin V作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發生。
PI和7-AAD是一種核酸染料,它不能透過完整的細胞膜,但對凋亡中晚期的細胞和死細胞,PI(或7-AAD)能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此將Annexin V與PI(或7-AAD)匹配使用,就可以將處于不同凋亡時期的細胞區分開來。
二、實驗目的:
檢測細胞凋亡率。
三、實驗步驟:
四、實驗結果展示:
五、送樣運輸要求:
武漢市內送樣,細胞量不低于1*106,流式檢測樣品需提供熒光信息,如果細胞帶熒光,一定要在交接單和培養板上備注,否則按照無熒光處理,如果因此導致檢測結果不可用及樣本浪費,我方概不負責,也不接受退單。