酶誘導是指細胞在底物影響下進行特定酶合成量增加的作用。藥物代謝主要發生在肝臟和腸道。其中肝臟代謝主要由位于肝細胞滑面內質網的細胞色素P450（Cytochrome P450，CYP）催化，少部分由非CYP酶（如UGT酶）催化代謝。據統計，臨床上超過90%的藥物由CYP450酶代謝。
PART.01 CYP450酶誘導機理及試驗方法
現已證明CYP450酶表達受孕烷X受體 (PXR)、組成型雄烷受體 (CAR)、芳烴受體（AHR）等核受體調控。這3個核受體均為轉錄因子，當與配體結合激活后，核受體會從細胞質轉入細胞核中。其中，PXR和AhR分別與細胞核內的視黃醛X受體（RXR）和轉運蛋白（ARNT）形成異源二聚體，進而結合在相應靶基因上（如CYP酶），調節CYP酶的表達。AhR參與CYP1A2的誘導；PXR主要參與CYP3A4的誘導，其次是2C亞家族；CAR與PXR的誘導譜非常重疊，此外有研究表明CAR還可以誘導CYP2B6。因此，在藥物早研期間，可只評估CYP1A2，CYP2B6 和 CYP3A4的誘導作用。
由于CYP酶誘導的試驗是從“轉錄"、“翻譯"、“蛋白質翻譯后修飾"直至成為活性CYP酶蛋白，所以CYP酶試驗系統必須是肝細胞而非其亞結構如肝微粒體或肝S9。隨后在CYP450酶誘導試驗時，通常需要結合酶活性和mRNA兩個水平上的結果做結論。當僅做酶活性試驗時，若藥物同時存在酶抑制現象時，可能會掩蓋誘導作用；而測量mRNA水平則能更真實地反應誘導源頭上的效應，且更為敏感，直觀地避免了酶活性檢測存在的問題。
鑒于此，為滿足客戶精準地了解其早研藥物的酶誘導作用，IPHASE技術人員成功研發人CYP450酶誘導表達檢測試劑盒（SYBR法）！
PART.02 IPHASE產品
IPHASE作為創新藥體外研究生物試劑，技術人員以SYBR染料法，采用ΔΔCT-定量PCR的方式檢測CYP1A2、CYP2B6和CYP3A4這三個CYP酶基因經奧美拉唑、苯巴筆脫和利福平誘導后其mRNA水平的變化，發現其mRNA倍數變化均顯著增加，滿足藥物相互作用指導原則，說明IPHASE人CYP450酶誘導mRNA水平檢測試劑盒（SYBR法）能夠滿足客戶在mRNA水平上進行酶誘導實驗。
IPHASE人CYP450酶誘導mRNA水平檢測試劑盒（SYBR法）提供給客戶提供進行qPCR試驗的擴增試劑，CYP1A2、CYP2B6和CYP3A4這三個CYP酶基因以及一個內參基因GAPDH的特異性引物。經驗證，IPHASE所提供的特異性引物擴增效率高，且熔解曲線無雜峰，滿足客戶的試驗需求。
圖1.CYP1A2引物擴增效率圖
注：R2=98.4%；Eff%=106.401%
（R2越接近100%擴增效率越好；Eff擴增效率越接近90%~110%越好，下同）
圖2.CYP2B6引物擴增效率圖
注：R2=98.5%；Eff%=95.791%
圖3.CYP2B6熔解曲線圖
圖4.CYP3A4熔解曲線圖
圖5.內參基因GADPH標準曲線圖
IPHASE/匯智和源憑借多年的研發經驗，推出了多領域、多種類的科研試劑，為藥物早期研發提供篩選工具，為生命科學領域的探索提供新材料、新方法和新手段，為食品、藥品、化學品等的遺傳毒性研究提供便捷產品，望廣大科研工作者咨詢。
發 文 章 得 獎 勵
凡使用本公司產品，在國內及國際刊物上發表論文（論文發表日起一年內），并注明產品屬于匯智和源/IPHASE所有，即可申請獎勵。根據發表刊物影響因子不同，給予不同金額獎品：
非SCI論文及IF≤5分，500元禮品；
5分＜IF≤8分 800元；
8分＜IF≤10分 1000元；
IF≥10分 2000元；
注：禮品卡也可兌換同等金額產品購買抵用券；
活動多多，禮品豐厚，快來參與吧！
關 于 我 們
匯智和源，致力于為創新藥研發企業及生命科學研究機構提供高品質的生物試劑，IPHASE為公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research"。
7
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務