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可見(jiàn)分光光度計(jì)的工作原理是什么?

閱讀:7803        發(fā)布時(shí)間:2020/9/30
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  利用可見(jiàn)光等測(cè)定物質(zhì)的吸收光譜,利用此光譜對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析和物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析的方法,稱(chēng)為分光光度法,使用的儀器是分光光度計(jì)。可見(jiàn)分光光度計(jì)是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、使用方便的單光束分光光度計(jì),是生物化學(xué)研究中*的基本手段之一。可見(jiàn)分光光度計(jì)的工作原理是:
  當(dāng)一束單色光照射待測(cè)物質(zhì)的溶液時(shí),當(dāng)某一定頻率(或波長(zhǎng))的可見(jiàn)光所具有的能量(hf)恰好與待測(cè)物質(zhì)分子中的價(jià)電子的能級(jí)差相適應(yīng)(即ΔE=E2-E1=hf)時(shí),待測(cè)物將對(duì)該頻率(波長(zhǎng))的可見(jiàn)光產(chǎn)生選擇性的吸收。用可見(jiàn)分光光度計(jì)可以測(cè)量和記錄其吸收程度(吸光度)。由于在一定條件下,吸光度A與待測(cè)物質(zhì)的濃度C及吸收地長(zhǎng)度l的乘積成正比,即AKCL,所以,在測(cè)得吸光度 A后,可采用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法比較法以及標(biāo)準(zhǔn)加入法等方法進(jìn)行定量分析。

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