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目錄:上海牧榮生物科技有限公司>>實(shí)驗(yàn)試劑>>試劑盒>> 總抗氧化能力(FRAP法)測(cè)試盒

總抗氧化能力(FRAP法)測(cè)試盒
  • 總抗氧化能力(FRAP法)測(cè)試盒
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總抗氧化能力(FRAP法)測(cè)試盒 總抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品.為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開(kāi)發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。

總抗氧化能力(FRAP法)測(cè)試盒

微量法100T/96S

注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

研究意義:

測(cè)定對(duì)象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測(cè)血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

測(cè)定原理:

在酸性環(huán)境下,還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的Fe2+-TPTZ的能力反映了總抗氧化能力。

自備實(shí)驗(yàn)用品:

恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,使用前預(yù)冷。

試劑一:液體15mL×1瓶,避光保存。

試劑二:液體1.5mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體1.5mL×1瓶,避光保存。

混合液(現(xiàn)配現(xiàn)用):將試劑一、試劑二、試劑三按10:1:1的比例混合,使用前37℃預(yù)溫。

樣品的制備:

(1) 血清、血漿、唾液或尿液等液體樣品

血漿(制備時(shí)可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝,不宜使用EDTA抗凝)4℃,5000rpm 離心10min,取上清待測(cè)。血清、唾液或尿液樣品直接用于測(cè)定,也可以-80℃凍存(不宜超過(guò)30 d)后再測(cè)定。

(2) 組織樣品

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

(3) 細(xì)胞樣品

按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎(功率200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

操作步驟:

  1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至593nm,蒸餾水調(diào)零。

  2. 操作表


空白管

測(cè)定管

混合液(μL)

180

180

樣品(μL)


6

雙蒸水(μL)

24

18

充分混勻,反應(yīng)20min,于微量石英比色皿/96孔板,測(cè)定593nm吸光值,△A= A測(cè)定-A空白

注意:空白管只需測(cè)定一次。

總抗氧化能力計(jì)算公式:

  1. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.8442x-0.0048,R2=0.9979

  1. 按樣本質(zhì)量計(jì)算

單位定義:每g樣本每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。

總抗氧化能力(U/g 鮮重)=(△A+0.0048)÷ 0.8442×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×W)÷T

                        =59.228×(△A+0.0048)÷W

  1. 按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位定義:每mg蛋白每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。

總抗氧化能力(U/mg prot)=(△A+0.0048)÷0.8442×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×Cpr)÷T

                        =59.228×(△A+0.0048)÷Cpr

  1. 按細(xì)胞計(jì)算

單位定義:每萬(wàn)個(gè)細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。

總抗氧化能力(U/104cell)=(△A+0.0048)÷0.8442×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量(萬(wàn)個(gè)))÷T

= 59.228×(△A+0.0048)÷ 細(xì)胞數(shù)量(萬(wàn)個(gè))

  1. 按液體體積計(jì)算

單位定義:每毫升樣本每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。

總抗氧化能力(U/mL)=(△A+0.0048)÷0.8442×1000÷T

= 59.228×(△A+0.0048)

V樣總:加入提取液體積,1 mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,6μL;T:反應(yīng)時(shí)間,20min;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL

b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.4221x - 0.0048;R2=0.9979

  1. 按樣本質(zhì)量計(jì)算

單位定義:每g樣本每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。

總抗氧化能力(U/g 鮮重)=(△A+0.0048)÷0.4221×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×W)÷T

                        =118.455×(△A+0.0048)÷W

  1. 按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位定義:每mg蛋白每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。

總抗氧化能力(U/mg prot)=(△A+0.0048)÷0.4221×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×Cpr)÷T

                        =118.455×(△A+0.0048)÷Cpr

  1. 按細(xì)胞計(jì)算

單位定義:每萬(wàn)個(gè)細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。

總抗氧化能力(U/104cell)=(△A+0.0048)÷0.4221×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量(萬(wàn)個(gè)))÷T

= 118.455×(△A+0.0048)÷ 細(xì)胞數(shù)量(萬(wàn)個(gè))

  1. 按液體體積計(jì)算

單位定義:每毫升樣本每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。

總抗氧化能力(U/mL)=(△A+0.0048)÷0.4221×1000÷T

= 118.455×(△A+0.0048)

V樣總:加入提取液體積,1 mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,6μL;T:反應(yīng)時(shí)間,20min;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL

 

注意事項(xiàng):

  1. 試劑二對(duì)人體有刺激性,請(qǐng)采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴乳膠手套操作。

  2. 盡量避免使用在酸性條件下呈藍(lán)色或接近藍(lán)色的試劑,否則對(duì)本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生干擾。

  3. 樣品中不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢劑和DTT、巰基乙醇等影響氧化還原反應(yīng)的還原劑。

上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國(guó)內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

  2. 國(guó)外試劑的訂購(gòu)。可提供歐美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購(gòu)方案。

  3. 提供加急物流處理,進(jìn)口貨物,最快交期1-2周。

  4. 進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。

  5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 質(zhì)量保證,所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式,為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開(kāi)發(fā)需求。公司整合國(guó)際與國(guó)內(nèi)資源,加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè),提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率,為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運(yùn)作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

總抗氧化能力(FRAP法)測(cè)試盒




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