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上海牧榮生物科技有限公司

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Bst DNA 聚合酶(大片段)介紹

閱讀:311      發布時間:2023-07-31
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Bst DNA 聚合酶(大片段)

用于 DNA 測序高 GC 區域以及納克量 DNA 模板的快速測序。

描述:
Bst DNA 聚合酶,大片段是嗜熱脂肪芽孢桿菌 DNA 聚合酶蛋白的一部分,包含 5′ → 3′ 聚合酶活性,但缺乏 5′ →3′ 核酸外切酶活性。

酶提供強大的鏈置換活性。最佳溫度為 60-65 ?C。Bst 在 80 ?C 時熱失活。Bst 聚合酶大片段由含有嗜熱脂肪芽孢桿菌 DNA 聚合酶基因的大腸桿菌菌株制備,缺乏 5′ → 3′ 核酸外切酶結構域。

Bst DNA 聚合酶大片段提供三種濃度:8,000 U/ml、50,000 U/ml 和 400U/ml,保存緩沖液為 10 mM Tris-HCl,pH 7.5、50 mM KCl、1 mM DTT、0.1 mM EDTA 、0.1% Triton X-100 和 50% 甘油。高濃度 (400U/ml) 還提供無甘油緩沖液和凍干粉末。
 

背景圖.jpg
圖:MCLAB Bst DNA 聚合酶(大片段)顯示出比其他兩個供應商的產品更高的鏈置換聚合酶活性。

 

應用:

- 核酸擴增方法,包括等溫擴增、LAMP
- 全基因組擴增 -
通過有問題的二級結構進行測序


使用 Bst DNA 聚合酶的典型 LAMP 方案

成分

最終濃度

25 µl 反應

Bst 的 10X 緩沖器

1X(不含MgSO4)

2.5 微升

硫酸鎂 (100 mM)

總計 8 mM

2.0 微升

dNTP 混合物 (10 mM)

每個 1.4 mM

3.5 微升

FIP/BIP 底漆 (10X)

1.6微米

1微升

F3/B3 底漆 (10X)

0.2微米

1微升

LoopF/B 引物 (10X)

0.8微米

1微升

Bst 大片段 (8,000 U/ml)

80-320 U/毫升

0.95-1.1 微升

DNA樣本

> 10份或以上

不適用

無核酸酶水


最多 25 µl

總反應體積


25微升














比活度: 120,000 U/mg


提供于:
10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1.0 mM DTT
0.1 mM EDTA
0.1% Triton X-100
50% 甘油
pH 7.5 @ 25°C
提供于:
10X PCR 緩沖液 II

10x PCR 緩沖液 II :
200 mM Tris-HCl
100 mM 硫酸銨
100 mM KCl
20 mM MgSO 4
1.0% Triton X-100
pH 8.8 @ 25°C

單位定義:
1 單位定義為將 10 nmol dNTP 轉化為酸所需的聚合酶量65°C 30 分鐘內不溶物質。

推薦儲存條件: -20°C

注意:

- 建議長期儲存:0.1% Triton X-100
- 不建議反應溫度高于 70°C。
- Bst DNA 聚合酶不能用于熱循環測序。


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上海牧榮生物科技有限公司

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