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pNZ2122乳酸乳球菌 矢量，mcs XH，食品級

交貨時間約 8 – 10天

訂單號：    VS-ELV01300

單位尺寸：  10微克

供應商：    MoBiTec GmbH

運輸：  逆轉錄

存儲：  4°攝氏度

產品子類別：    乳球菌表達系統

圖片：  pNZ2122.png

 

1引言

乳酸乳球菌和其他乳酸的組成型基因表達系統由荷蘭NIZO食品研究公司開發的細菌易于操作且易于操作對于以下應用程序具有優勢：

?過量表達同源和異源基因用于功能研究和

獲得大量的特定基因產物

?代謝工程

?適合蛋白質分泌

1.1乳酸乳球菌  MOBITEC專業代理

乳酸乳球菌是同型發酵細菌。它的主要功能是快速乳酸由糖產生酸。廣泛具有的功能特征

乳球菌研究包括碳代謝，細胞外和細胞內蛋白水解系統，抗生素物質的產生及其與和抵抗噬菌體。許多乳酸乳球菌菌株的基因組信息是公開的可用。豐富的知識和經驗導致了乳球菌的使用。

生物技術的幾個領域，例如細菌和病毒抗原的表達通過粘膜免疫接種，人細胞因子產生及其他安全接種原位治療的治療劑，乳球菌作為細胞工廠的用途特定化合物的生產以及藥品的中試生產（Mierau，2005年）。

 

1.2乳酸乳球菌質粒在其他革蘭氏陽性細菌中的用途  MOBITEC專業代理

具有復制源于乳酸乳球菌的質粒可用于所有乳酸菌和在其他革蘭氏陽性細菌中，例如枯草芽孢桿菌（Silke David，1989，AEM55：1483;克里斯·普拉特（Chris Platteeuw），1994，AEM 60：587。伊麗莎白·索維格（Elisabeth Sorvig），2005年，微生物學，151：2439; Indranil Biswas，2008，微生物學，154：2275）。

 

 

1.3密碼子用法

直到近，密碼子的使用還是一個重要的問題，在乳酸乳球菌中表達異源基因（DNA的GC含量為35-37％）。當一個基因供體生物與乳酸乳球菌密切相關，或者DNA GC含量與

與乳酸乳球菌相比，基因成功表達的可能性很高。如今，廉價，可靠的量身定制的DNA合成技術已經面世，對特定靶基因起源的限制，如已知氨基酸序列，可以設計與宿主密碼子使用模式匹配的基因生物。除了一般的密碼子優化外，還可以使用特定的密碼表，例如高度表達的核糖體蛋白基因的密碼子表，以進一步增加產品形成。

2個產品

2.1宿主菌株

乳酸乳球菌亞種。 creemoris MG1363乳品菌株NCDO712的無質粒子代。廣泛使用的宿主菌株乳酸乳球菌的克隆和基因表達（Gasson，1983）。

乳酸乳球菌NZ3000

食品級選擇的標準品系基于乳糖生長的能力。的通常存在于質粒中的乳糖操縱子已整合到

染色體和lacF基因被刪除。 lacF基因的缺失使該菌株除非在質粒上提供lacF，否則無法在乳糖上生長（van Alen-Boerrigter andde Vos，未發布的數據； de Ruyter et al。，1996）。

乳酸乳球菌NZ1330

該宿主菌株是根據alr選擇用于食品級表達系統的標記。它是通過刪除alr基因（一種丙氨酸消旋酶編碼基因）而產生的，在祖先菌株MG1363中。 alr基因的缺失導致營養缺陷

必需成分D-丙氨酸，表明該菌株無法在培養基上生長除非在質粒上提供了alr，否則無需D-丙氨酸即可將L-丙氨酸轉化為D-丙氨酸。 alr基因可作為食品級補充標記（Bron等，2002）。

 

 

2.2質粒

所有質粒均基于pSH71滾環復制子（de Vos，1987）。MOBITEC

pNZ124：具有乳酸乳球菌多個克隆位點的通用廣譜宿主克隆載體和其他乳酸菌；氯霉素選擇； （Platteeuw等，1994）MOBITEC

pNZ2103：在宿主的控制下用于組成型基因表達的廣泛宿主載體lacA啟動子；用于轉錄融合；氯霉素選擇； （Platteeuw等，1996）MOBITEC

pNZ2105：具有多個乳桿菌克隆位點的通用食品級克隆載體 MOBITEC

NZ3000；基于LacF的選擇； （Platteeuw等，1996）MOBITEC

pNZ2122：在lacA控制下用于組成型基因表達的食品級載體乳酸乳球菌NZ3000的啟動子；用于轉錄融合；基于LacF的選擇；（Platteeuw等，1996） MOBITEC

pNZ2123：食品級載體；與pNZ2122相同，但具有多個克隆位點  基于LacF的選擇； （Platteeuw等，1996） MOBITEC

pNZ2125：具有適用于基因的多個克隆位點的食品級克隆載體 表達到乳酸乳球菌菌株NZ1330中；基于alr的選擇； （Platteeuw等，1996） MOBITEC

pNZ7021：在宿主的控制下用于組成型基因表達的廣泛宿主載體  強啟動子PpepN；氯霉素選擇； （Wegkamp et al。，2007）該載體設計用于翻譯融合。它包含pepN核糖體結合

位點（RBS）和起始密碼子（ATG），然后是SphI位點，這對于沒有自身核糖體結合位點的靶基因的克隆和起始密碼子。MOBITEC

pNZ7025：在pepN控制下用于組成型基因表達的食品級載體發起人基于alr的選擇； （Wegkamp et al。，2007）該載體還被設計用于如上所述的質粒的翻譯融合。MOBITEC

pNZ7021  注意：重要的是要考慮為轉錄融合只能用于使用任何可能的克隆位點克隆具有自身核糖體結合位點和自身起始密碼子的靶基因。但是，那設計用于翻譯融合的表達載體同時提供啟動子和翻譯  起始區域，包括RBS和起始密碼子的序列，后跟一個重要的克隆位點。在這種情況下，必須使用相應的限定的限制性位點，導致開放框在框內插入閱讀框（ORF）。

所有質粒均從水中凍干。使用TE緩沖液或水重新配制質粒DNA。MOBITEC

 

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