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北京華新康信生物科技有限公司代理Novus品牌。北京華新康信生物科技有限公司是Novus品牌代理商。

NBP1-71648 Novus  大量現貨，歡迎電聯，真誠合作共贏。

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Novus代理 北京華新康信生物科技有限公司

產品列表如下：

產品貨號       產品名稱       品牌

NBP1-71648  Mouse Monoclonal mtTFA Antibody (18G102B2E11)       NOVUS

H00011232-B01P Mouse Polyclonal POLG2 Antibody    NOVUS

NB110-7081H      Mouse anti-Human IgG4 Fc fragment Secondary Antibody (5C7) [HRP] novus

NBP1-78159  Mouse Monoclonal LDL R Antibody (C7)   NOVUS

NB100-56698       Rabbit Polyclonal MyD88 Antibody [IMGENEX: IMG-178]       NOVUS

NBP2-62766  Human HMGB1/HMG-1 ELISA Kit (Colorimetric)     NOVUS

NBP1-47518AF488      Calreticulin Antibody (1G6A7) [Alexa Fluor 488]       novus

北京華新康信生物科技有限公司專注于生命科學領域，由豐富從業經驗的技術團隊和管理團隊組建而成，主營生物化學試劑，儀器，實驗耗材等。

1廣泛的產品輻射領域，試劑，耗材，儀器等。

2產品種類齊全，北京華新康信與國外諸多生命科學領域*合作眾多，代理品牌Glycan Therapeutics，Intact Genomics，Integral Molecular，Medkoo，Niomech，Terragene，Anshlabs wako，EZbioscience，CMCTAG，Anatrance ，Favorage ，Affinity，Advanced biomatrix，bioplastics，天地人和，TRC，凱杰，義翹，sciencell；價格優勢品牌：seracare，Streck，Toxin，Zeptometrix，sigma，ForteBio，CanSyn，Novus，santa，chormsystems，bethyl ，moltox， permagenlabware ，bioflux，Bio－Rad， coriell，   listlabs， ZYMO ， ABclonal  ， EY laboratories  ，greatcellsolar ， agdia ， beckman ， Bioxcell，，biomax ，usascientific ， TRC ，novus ，americanelements，cayman  ， Fisher ，thermofisher ，  nanopore，   日立，  三菱株式會社 ，RD， takara等，緊跟生命科學的發展，不斷滿足客戶的需求，為各位的科研之路上添磚加瓦！

3 一手貨源，價格優勢明顯

4信譽良好，客戶范圍廣，包括清華、北大、交大、復旦、中山等100多所高校，百泰藥業，康龍化成，藥明康德等企業。

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肽封閉-一種確認抗體特異性的方法。

背景：抗體與目標表位的特異性結合是產生準確表達數據所必需的?？贵w與非靶標抗原的結合（也稱為非特異性結合）會增加背景信號并使數據解釋復雜化。在蛋白質印跡分析中，通常會通過多個條帶輕松識別非特異性結合。但是，在免疫組織化學，ELISA，流式細胞儀，ChIP和其他基于抗體的應用中，非特異性抗體結合的鑒定可能更加困難。

什么是封閉肽？封閉肽是由對應于抗體表位（抗體識別的抗原的特定片段）的氨基酸序列組成的肽。阻斷肽將與靶抗體特異性結合，從而防止隨后的抗體與靶表位結合。

 

封閉肽如何發揮作用？可以利用抗體對其表位的高親和力來確認結合特異性。用足夠的肽對抗體進行預溫育會占據所有抗體結合位點，從而阻止樣品中后續靶蛋白的結合。

運行封閉肽測定后如何知道我的抗體是否特異性？為了確認抗體的特異性，比較用對照抗體和封閉抗體染色的樣品之間的信號強度。如果抗體對目標表位具有特異性，則與封閉抗體一起孵育的實驗樣品將顯示出比對照抗體（單獨的抗體，未封閉）弱的信號。

在Western blot中我的肽封閉數據應該是什么樣的？如果抗體與過量的肽一起孵育并且所有結合位點都被占據（封閉），則與封閉抗體一起孵育的樣品應無信號。

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蛋白質印跡法

介紹

蛋白質印跡使用抗體來識別細胞或組織裂解物中的單個蛋白質。抗體與高度特異性的氨基酸序列結合，稱為表位。由于氨基酸序列因蛋白質而異，因此蛋白質印跡分析可用于鑒定和定量包含數千種不同蛋白質的裂解物中的單個蛋白質。先，通過SDS-PAGE凝膠電泳根據蛋白質的大小將蛋白質彼此分離。接下來，通過施加電流將蛋白質從凝膠轉移到膜上。然后可以用對目標靶蛋白具有特異性的一抗處理該膜。下一個，

裂解液的制備

亞細胞定位    推薦緩沖液

全細胞裂解液       NP-40

核    里帕

線粒體    里帕

細胞質    鹽酸

膜結合蛋白    里帕

吸出PBS，并加入冰冷的裂解緩沖液（每融合10 7個細胞/ 100mm皿/ 150 cm 2燒瓶加入1 mL ）。請參見下表，以根據目標蛋白質的亞細胞位置推薦裂解緩沖液。

用冰冷的PBS在冰上洗滌細胞培養皿。

吸出PBS，并加入冰冷的裂解緩沖液（每融合10 7個細胞/ 100mm皿/ 150 cm 2燒瓶加入1 mL ）。請參見下表，以根據目標蛋白質的亞細胞位置推薦裂解緩沖液。

使用細胞刮刀，將粘附的細胞從培養皿上刮下來，并將細胞懸浮液轉移到微量離心管中。如果需要，可以將細胞用胰蛋白酶消化并用PBS洗滌，然后再重懸于裂解緩沖液中。

在4°C下攪拌細胞30分鐘。

在4°C下離心細胞裂解液混合物。時間和離心力因每種細胞類型而異，但是一般指導原則是在12,000 rpm下20分鐘。

將上清液（裂解液）轉移到冰上的新試管中。

樣品制備

確定每個細胞裂解液的蛋白質濃度。

確定要加載的蛋白質量（推薦：10-50μg/泳道），并添加等體積的2X Laemmli緩沖液。

通過將裂解液在樣品緩沖液中于95-100°C下煮沸5分鐘來減少樣品并使樣品變性。僅在抗體數據表建議使用非還原或非變性條件時才應跳過此步驟。