詳細介紹
從組織中有效釋放細胞需要膠原酶和中性蛋白酶的共同作用。每摩爾膠原酶由4g原子鈣(Ca2+) 酶激活。培養濾液被認為含有分子量在68-130 kDa之間的至少7種不同的蛋白酶。適宜pH范圍為6.3-8.8。這種酶通常用于消化組織樣本中的結締組織成分,以釋放單個細胞。膠原酶治療會導致一些細胞死亡。通常,消化濃度從0.1到5 mg/mL不等。為產生令人滿意的細胞解離效率并不會造成太多的細胞死亡,其反應時間從15分鐘到幾個小時不等。使用含有鈣和BSA的Krebs Ringer緩沖液,Zn2+ 是活性必需的。該酶識別序列 -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-,其中X通常是中性氨基酸。乙二醇雙(β-氨基乙基醚)-N,N,N′,N′-四乙酸(EGTA)4;β-巰基乙醇;谷胱甘肽(還原型));巰基乙酸鈉;2、2′-聯吡啶;8-羥基喹啉、半胱氨酸具有抑制該酶活性的作用。
每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。
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膠原酶IA,CAS:9001-12-1
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