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技術文章

在PCR反應體系中添加劑DMSO的作用

閱讀:2053          發布時間:2023-12-27

DMSO主要用于高GC含量的模板擴增,可能的機理是改善GC含量高的DNA的變形情況,降低其二級結構,使得聚合酶在二級結構處延伸。
DMSO可以提高PCR的特異性,幫助擴增一些難擴的模板。
當體系中加入DMSO時,可適當降低退火溫度。
在實踐中,聚合酶鏈式反應可能因各種原因而失敗,通常表現為兩個問題,一是目的模板的擴增量太少,二是非目的基因擴增太多。
這種情況研究人員通常會在反應體系中加入合適的添加劑進行解決。
通常添加劑的作用主要是降低基因的二級結構或者降低非特異性的啟動。

下面是幾種常用的添加劑以及它們的作用:
① 二甲基亞砜DMSO、非離子性洗滌劑、甜菜堿——可以降低DNA二級結構
② 甲酰胺、四甲基氯化銨TMAC——降低非特異性啟動
③ 鎂離子——聚合酶的一個輔因子
④ 牛血清白蛋白——減少污染物

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