黃酮中處于相鄰位的羰基、羥基可以共同絡合金屬而顯色。在中性或弱堿性及亞硝酸鈉存在條件下,黃酮類化合物與鋁鹽生成螯和物,加入堿溶液后顯紅橙色,在510nm處有大吸收峰。蘆丁是*的黃酮類化合物,常被用作標準品。
試劑一:無色液體50mL ×1瓶
試劑二:無色液體50mL ×1瓶
試劑三:顯色液200mL ×1瓶
試劑四:1.0mg/mL蘆丁標準溶液5mL×1瓶
試劑一、試劑二4℃保存,試劑三-20℃保存,可保存3個月。
試劑四應用液:
取2mL試劑四,加入18mL雙蒸水,稀釋至20mL,得到100μg/mL的蘆丁標準液,分別采用移液管移取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL試劑四于空試管中,加入4.0,3.0,2.0,1.0,0mL雙蒸水,得到20,40,60,80,100 μg/mL蘆丁標準液。
| 標準管1 | 測定管 | 空白管2 |
試劑一應用液(mL) | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
樣品溶液(mL) |
| 2 | 2 |
試劑四應用液(mL) | 2 |
|
|
充分混勻,室溫靜置6min。
試劑二(mL) | 0.5 | 0.5 |
|
雙蒸水(mL) |
|
| 1 |
充分混勻,室溫靜置6min。
試劑三(mL)3 | 2 | 2 | 2 |
充分混勻,室溫靜置15min,以試劑空白調零,分光光度計510nm處測吸光值。
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