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PCR擴增儀又稱為PCR基因擴增儀、PCR核酸擴增儀、聚合酶鏈反應核酸擴增儀,是利用PCR(Polymerase chain reaction,聚合酶鏈反應)技術對特定DNA擴增的一種儀器設備,被廣泛運用于醫學、生物學實驗室中。
PCR擴增儀通常由熱蓋部件、熱循環部件、傳動部件、控制部件和電源部件等部分組成。
PCR技術的原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于靶序列兩端互補的寡核苷酸引物,由變性-退火-延伸三個基本反應步驟構成。
1. 普通PCR儀
一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀稱作傳統PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是用于簡單的、對目的基因退火溫度的擴增。該儀器主要應用于科學研究、教學、醫學臨床、檢驗檢疫等機構。
2. 梯度PCR儀
一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度,通常有12種溫度梯度)的PCR儀稱作梯度PCR儀。因為被擴增的不同DNA片段,其適退火溫度是不同的,通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增,就可以篩選出表達量高的適退火溫度,進行有效的擴增。用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣節約成本的同時也節約了時間。梯度PCR儀在不設置梯度的情況下也可以做普通PCR擴增。主要應用于科研、教學機構。
3. 原位PCR儀
用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀稱作原位PCR儀。如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性,使PCR反應體系滲透到組織和細胞中,在細胞的靶DNA所在位置上進行基因擴增。不但可以檢測到靶DNA,又能標出靶序列在細胞內的位置,對于在分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和臨床過程及病理的轉變有重大的實用價值。主要應用于臨床、科研。
4. 實時熒光定量PCR儀
在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統和計算機分析處理系統的PCR儀稱作熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統得出量化的實時結果輸出。把這種PCR儀叫做實時熒光定量PCR儀(qPCR儀)。熒光定量PCR儀有單通道、雙通道和多通道。當只用一種熒光探針標記的時候,選用單通道,有多熒光標記的時候用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記的目的基因表達產物,因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量,需多次擴增才能檢測完不同目的基因片段的量。主要用于醫學臨床檢測、生物醫藥研發、食品行業、科研院校等機構。
PCR基因擴增儀的使用方法:
(1)首先準備好反應管;
(2)打開機蓋,將反應管平穩、端正地置入,蓋好機蓋;
(3)打開電源開關,按照機器屏幕顯示的提示設定程序。
PCR擴增儀在實驗室中的作用:
PCR基因擴增儀采用專有的技術,有效避免了熱傳導的邊緣效應問題,為PCR實驗提供溫度均一性,確保實驗結果的可靠性和重復性,的溫控系統,模式顯示金屬模塊的溫度變化,TUBE模式能模擬試管內試劑的溫度變化,甚至考慮到了PCR反應體系對溫度變化的影響,模塊具有溫度梯度功能,為前沿科研工作者提供30℃的溫度梯度范圍,滿足苛刻的優化實驗需求。
PCR基因擴增儀不僅擁有30℃的寬限梯度功能,可用來優化實驗條件,滿足苛刻的實驗需求,同時延續了“USB”和聯機聯網功能,PCR界產品的時尚,在之前基礎上,增加了LCD彩色觸摸屏,使實驗的顯示和操作更為清晰和直接。
PCR擴增儀的選購標準:
實際上,PCR儀就是一個溫度變化控制的設備,因此一般來說,在選擇是的時候,溫度控制是首先需要考慮的,準確控溫是PCR儀質量好壞的關鍵,這其中就包括溫度準確性、溫度均一性、升降溫速度等。
另外退火溫度也是影響PCR儀擴增特性的一個重要因素,在理想狀態下,退火溫度需要足夠低,以保證引物同目地序列有效結合,同時又需要足夠高,以減少引物與DNA片段的非特異性結合。
后一個標準就是儀器的耐用性。由于PCR實驗目前已經成為生命科學基礎研究和檢測實驗室常規的實驗方法,因此很多的實驗室中多需要開展大量的PCR實驗,這對于PCR儀是一個重要的考驗,需要該儀器有充分的耐用性來適應頻繁的試驗過程。而影響儀器的使用壽命,如果不考慮維修的成本,則主要與半導體制冷片的壽命相關。
進口PCR儀和國產的PCR儀,在技術和使用性能上基本上沒有多大的差別,比如:升降溫速率,孔間溫差,溫度均一性,梯度溫度范圍,熱蓋溫度等性能指標,國內外儀器基本達到了相同水平。PCR儀器的核心器件和技術為半導體及其溫控技術,而現在大多數國產PCR廠家所用的都是進口的原核心配件。這就是為什么大多數PCR儀廠家的性能指標基本雷同的原因!上海惠誠生物科技有限公司代理銷售眾多品牌PCR擴增儀,在選購時更傾向于向大家推薦國產經濟實惠型,如果您在選購時需要技術支持,請聯系上海惠誠生物科技有限公司
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