產品簡介
詳細介紹
口蹄疫病毒O型檢測試劑盒
產品名稱】
通用名稱:口蹄疫病毒O型檢測試劑盒(實時熒光PCR法)
英文名稱:Foot and Mouth Disease Virus(serotype O)Detection Kit (Real-Time PCR Method)
【包裝規格】 25T/盒 & 50T/盒
【預期用途】
口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV) 屬于小RNA病毒科,口蹄疫病毒屬,主要侵害偶蹄獸,有O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asia-I七個血清型。口蹄疫發病以發熱、口腔黏膜及蹄部和乳房皮膚發生水泡和潰爛為特征,是獸疫局規定的A類傳染病,易通過空氣傳播,傳染性強,流行迅速,偶爾感染人。由于口蹄疫傳播迅速、難于防治、補救措施少,被稱為畜牧業的“*殺手”。
本試劑盒利用實時熒光PCR原理,定性檢測口蹄疫O型病毒(FMDV-O),對FMDV-O引起的偶蹄獸類病的診斷和監控具有重要指導意義。
【檢驗原理】
本試劑盒針對口蹄疫病毒O型的高度保守區域設計特異性引物和探針,在反應體系中含口蹄疫病毒O型基因組模板的情況下,PCR反應得以進行并釋放熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應通道信號進行實時監測和輸出,實現檢測結果的定性分析。
【主要組成成份】
序號 | 組成 | 25T/盒 | 50T/盒 |
1 | FMDV-O RT-PCR反應液 | 375 μL×1管 | 750 μL×1管 |
2 | FMDV-O逆轉錄酶 | 50 μL×1管 | 100 μL×1管 |
3 | FMDV-O Taq酶 | 75 μL×1管 | 150 μL×1管 |
4 | FMDV-O陽性對照 | 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |
5 | FMDV-O陰性對照 | 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |
6 | 說明書 | 1份 | 1份 |
注:陰性對照為偶蹄獸類基因組DNA,陽性對照為失去活性的FMDV-O病毒cDNA。
【儲存條件及有效期】避光-20℃以下保存,避免反復凍融,有效期12個月。
【適用儀器】ABI 系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列 、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道實時熒光定量PCR儀。
【樣本要求】
新鮮采集的咽拭子、皰疹液和糞便標本,并使用滅菌生理鹽水懸浮。
2.應避免標本間交叉污染。
3.標本收集后可立即檢測;若不能立即檢測,可置于2~8℃冷藏過夜保存;如需長期保存,標本應凍存于-80℃以下,避免反復凍融。
【檢驗方法】
1. 試劑準備(試劑準備區)
(1)從冰箱中取出試劑盒, 從試劑盒中取出實驗所需試劑,充分融化混勻并瞬時離心以去除管壁附著液體。
(2)核算當次實驗所需要的反應數(n),并根據如下表所示反應體系計算當次實驗所需要的各種試劑量。
n =陰性對照數(1T)+陽性對照數(1T)+誤差預留量(1T)+樣本數
單反液配制表(每份) | RT-PCR反應液 | 15.0 μL |
逆轉錄酶 | 2.0 μL | |
Taq酶 | 3.0 μL |
(3)在無菌離心管中加入上述試劑,充分混勻后瞬時離心。按照20 μL/管分裝量將試劑分裝至PCR反應管。
2.樣本準備(樣本處理區)