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原位末端凋亡法(Tunel)實驗技術
TUNEL技術簡介:
TUNEL 技術,即脫氧核苷酸末端轉移酶(Term inal2deoxynucleo t idyl t ran sferase,TdT 介導的x2dU TP 缺口末端標記(TdT 2m ediatedx2dU TP n ickend labeling, TUN EL)技術,是目前原位檢測細孢凋亡敏感、快速、特異 的新方法,已廣泛應用于生物、醫學研究領域。
TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL)星一種用來檢細胞凋亡(apoptosis)的分析方法,細胞凋亡有一項重要的持征為細胞內的DNA會碎裂成片段(DNA fragmentation), TUNEL可以有效的探測(DNA)片段的產生,所以可以傳達組胞凋亡的訊息。TdT為terminal deoxynucleotidyl transferase,此種酵素可以在沒有DNA模板的堉形下, 連結核甘酸到DNA的3’-0H處。1992年,以色列科學家Gavrieli等人將TdT引為標定DNA片段的一個酵素,自此衍生出TUNEL此項技術。TUNEL的好處是可以在細胞凋亡發生的早期,即可偵測到DNA片段的產生,井且可以直接使用在組織切片上,觀察細胞凋亡發生的位罝。所以TUNEL目前為廣泛接受與使用的一種銦胞凋亡的分析方法。
樣本要求
取材保持組織新鮮(組織塊大小:2*1.5*0.3cm為宜),立即放固定液(10%的福爾馬林或4%的多聚甲醛緩沖液,體積為組織塊的10倍以上),避免干燥;對于有血跡的樣本,可用PBS液或生理鹽水沖洗后直接放入固定液中,經固定后的樣本必須在48h內處理。
服務流程
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