實時熒光原位雜交技術fish檢測 應用：
實時熒光原位雜交技術fish檢測(Florescence In-Situ Hybridization簡稱FISH)是一種利用非放射性的熒光信號對原位雜交樣本進行檢測的技術。它將熒光信號的高靈敏度、安全性，熒光信號的直觀性和原位雜交的高準確性結(jié)合起來，通過熒光標記的DNA探針與待測樣本的DNA進行原位雜交，在熒光顯微鏡下對熒光信號進行辨別和計數(shù)，從而對染色體或基因異常的細胞、組織樣本進行檢測和診斷，為各種基因相關疾病的分型、預前和預后提供準確的依據(jù)。自20世紀80年代末，Pinkel和Heiles將FISH技術引入染色體檢測領域后，F(xiàn)ISH技術就在臨床診斷及科研工作中得到了廣泛的運用，顯示出與一些傳統(tǒng)技術相比的明顯優(yōu)勢。

實時熒光原位雜交技術fish檢測與傳統(tǒng)的免疫組織化學法（IHC）相比，F(xiàn)ISH具有良好的穩(wěn)定性和可重復性。目前免疫組織化學法正廣泛應用于腫瘤等多個領域的臨床診斷。免疫組化的檢測對象是疾病相關的蛋白。由于蛋白的表達和本身的構象受各種因素的影響很大（例如酸、堿和變性劑），檢測條件的穩(wěn)定性對檢測結(jié)果至關重要。此外，免疫組化檢測結(jié)果的判斷依賴于檢測者對顯色結(jié)果的主觀判斷，對于一些弱陽性的結(jié)果，不同的檢測者容易產(chǎn)生分歧。上述的因素都可能影響醫(yī)生對病情的終診斷。

實時熒光原位雜交技術fish檢測的對象是細胞中的DNA，致密的雙螺旋結(jié)構使DNA可以歷經(jīng)千百萬年而依然保持良好，其結(jié)構穩(wěn)定，不易被環(huán)境條件影響，為熒光原位雜交技術的穩(wěn)定提供了良好的基礎。此外，熒光原位雜交結(jié)果的判定借助于對熒光的顏色判斷和信號計數(shù)，客觀地量化了檢測地結(jié)果。如果借助于相應的FISH操作系統(tǒng)（例如Abbott-Vysis公司的Hybrit雜交儀和VP2000樣本預處理系統(tǒng)）和染色體成像系統(tǒng)（例如AI公司的CytoVision）就能實現(xiàn)整個FISH操作的自動化，大限度的降低操作者和檢測者的主觀因素，確保結(jié)果的準確性。

PCR由于靈敏度高，操作簡便快捷是近年來應用比較多的基因診斷技術，但PCR診斷技術的假陰性和假陽性的比例較高，對同一樣本也只能作一次分析，不能重復實驗結(jié)果。隨著探針技術的不斷發(fā)展，F(xiàn)ISH目前的靈敏度已經(jīng)接近或達到PCR的水平，并能很好彌補PCR技術的局限。熒光原位雜交技術fish檢測不僅有極低的假陽性、假陰性的比例（以Abbott-Vysis的產(chǎn)前診斷探針為例，29,000例的使用結(jié)果證實正確率高達99.9％），還能對同一樣本進行多次的FISH操作以及利用不同顏色的熒光探針一次檢測多個染色體或基因的異常，大大節(jié)省了檢測的時間。此外，通過FISH可以對染色體或特定基因的數(shù)目異常，特定片斷的缺失、易位和重排進行診斷研究。