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GL-261-LUC（小鼠膠質細胞瘤-熒光素酶標記）上海淳麥生物科技有限公司是一家專注于研發和生產免疫細胞及干細胞相關產品的生物高科技企業，致力于打造國內原代細胞研發和服務平臺，做“您身邊的細胞培養專家“。產品涵蓋免疫細胞及干細胞、細胞系、*培養基、無血清培養基、基礎培養基、血清、轉染試劑、胰酶等細胞培養產品。

一、細胞基本屬性
細胞名稱	GL-261-LUC（小鼠膠質細胞瘤-熒光素酶標記）
細胞別稱	GL-261-LUC；小鼠膠質細胞瘤-熒光素酶標記
種屬來源	小鼠
組織來源	膠質瘤
生長特性	貼壁生長
細胞形態	成纖維細胞樣
細胞代數	10代以內
細胞規格	1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測	無
培養基	87%DMEM+10% FBS+1%GlutaMAX-1谷氨酰胺+1%HEPES 1M Buffer solution+PS
培養條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
細胞貨期	現貨，1周左右
運輸方式	復蘇發貨（T25瓶免運輸費用）/凍存發貨（需加干冰運輸費用）順豐快遞
供應限制	僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
特別說明	以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主
二、細胞培養操作
收貨方式		T25瓶	凍存管
收貨處理		觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養箱放置2-4h，以便穩定細胞狀態	收到細胞后，需立即轉入液氮凍存或直接復蘇
傳代密度		細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養	第三天換液并檢查細胞密度
傳代比例		傳代建議1：2傳代 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿	一管細胞建議接種到10cm培養皿或者T25瓶
傳代方法		a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 -3min（視細胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml*培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。 c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。	將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL*培養基，培養過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。
注意事項		1.運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。 2.因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及死亡破碎形成碎片，是正常現象。	1.收貨時若發現干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細胞接種觀察，若未融化可以將細胞按正常步驟保存； 2.為保證細胞的高存活率，收到產品后，請立即解凍復蘇細胞。
到貨須知	1.收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，干冰運輸的細胞檢查干冰是否*揮發，細胞是否解凍，若有上述現象發生請及時和我們聯系。 2.靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照（當天以及第 2,3 天請拍照），記錄細胞狀態 (所拍照片將作為后續服務依據)；建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長狀態。 3.由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。 4.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

三、細胞凍存操作
凍存液配方	無血清凍存液，液氮儲存
細胞密度	待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例
凍存方法	a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。 b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5x10 6~1x107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項	凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調整實驗方案

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