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細胞名稱:U20S-LUC人骨肉瘤細胞+LUC 種屬來源:人 生長條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 傳代方法:1:2至1:3,每周 3次 凍存條件:無血清凍存液,液氮儲存 支原體檢測:無 U20S-LUC人骨肉瘤細胞+LUC培養操作 1)復蘇細胞:將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2ml培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例; a、收集細胞及細胞培養液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細胞,進行細胞計數。 b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
HELA-S3 | 人宮頸癌細胞 |
HCC94 | 人子宮鱗癌細胞(高分化) |
HEC-1-B | 人子宮膜腺癌細胞 |
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RL95-2 | 人子宮內膜癌細胞 |
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HEC-1-A | 人子宮內膜腺癌細胞 |
BT474 | 人乳腺癌細胞 |
BT-549 | 人乳腺癌細胞 |
HS578T | 人乳腺癌細胞 |
MCF-7 | 人乳腺癌細胞 |
MDA-MB-231 | 人乳腺癌細胞 |
MDA-MB-361 | 人乳腺癌細胞 |
Bcap-37 | 人乳腺癌細胞 |
BT-20 | 人乳腺癌細胞(暫不提供) |
MDA-MB-435 | 人乳腺癌細胞(暫不提供) |
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HSF | 人皮膚成纖維細胞 |
Bel-7402 | 人肝癌細胞 |
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