小鼠牙乳頭細胞介紹

小鼠牙乳頭細胞分離自牙乳頭組織；牙乳頭細胞來源于外胚間充質，具有多向分化潛能，是體內分化為成牙本質細胞的前體細胞，該細胞在牙發育和牙體牙髓損傷修復過程中起重要作用。牙乳頭細胞為未分化的間充質細胞，有少量微細的膠原纖維分散在細胞外間隙。在鐘狀期，被成釉器凹陷部包圍的外胚間葉組織增多，并出現細胞的分化。在內釉上皮的誘導下，牙乳頭外層細胞分化為高柱狀的成牙本質細胞。這些細胞在切緣或牙尖部為柱狀，在牙頸部細胞尚未分化成熟，為立方狀。牙乳頭在牙發育中有重要作用。現已證明，牙乳頭是決定牙形狀的重要因索。例如，將切牙的成釉器與磨牙的牙乳頭重新組合，結果形成磨牙；與此相反，切牙的牙乳頭與磨牙成釉器重新組合，結果形成切牙。牙乳頭還可以誘導非牙源性的口腔上皮形成成釉器。

本公司生產的小鼠牙乳頭細胞采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞純度可達85%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

小鼠牙乳頭細胞培養方法：
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置3-4小時以穩定細胞狀態，然后換用新鮮*培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml*培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，后放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）待細胞*貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。 
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至含5ml*培養基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀用5ml*培養基重懸，接種25cm2培養瓶，于37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）第二天，換用新鮮*培養基繼續培養。