*0 Electro
*0 Electroporation-Competent Cell
產品規格:

*0 電轉化感受態細胞基因型：

F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU  galK

rpsL (Strr)endA1 nupG

*0 電轉化感受態簡要說明：

*0 電擊感受態細胞只能用于電擊轉化，不能用于熱激轉化。-CMbio-

*0 來源于 MC1061 菌株，是目前實驗室常用的感受態細胞之一，基因型與 DH10B 高度類似 (DH10B 為 galE15 型，而 *0 為 galU 型)。*0 生長速度快 (比 DH5α快，但比 Mach1-T1 生長速度慢)，10 小時可見克隆。recA1 和 endA1 的突變有利于插入 DNA 的穩定和高純度質粒 DNA 的提取。可用于構建克隆，藍白斑篩選等實驗，具有鏈 霉素抗性。-CMbio-

1. -CMbio-*0 電擊感受態細胞經特殊工藝制作，pUC19 質粒檢測轉化效率可達 1×1010 cfu/μg DNA。

*0 電轉化感受態操作說明：

1. 0.1 cm 電擊杯和杯蓋從儲存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上 5 分鐘，待其瀝干水分，正置 5 分鐘，使乙 醇充分揮

發，待乙醇揮發干凈立即插入冰中，壓實冰面，電極杯頂離冰面 0.5 cm 以方便蓋上杯蓋，冰中 靜置 5 分鐘充分降溫。

2. 取-80℃保存的 *0 電擊感受態細胞插入冰中 5 分鐘，待其融化，加入目的 DNA (質粒或連接產物) 并用手 EP 管底輕輕混勻，避免產生氣泡，立即插入冰中。-CMbio-
A. 測定轉化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的對照質粒  pUC19；-CMbio-

B. 對于連接產物，請用乙醇沉淀 DNA 后加入適量 TE 緩沖液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重 懸，DNA 濃 度不超過 100 ng/μl，體積不超過 5 μl/50 μl 感受態。-CMbio-
3. 用 200 μl 槍頭(用刀切除 0.5cm 槍尖)將感受態-DNA 混合物快速移到電擊杯中，避免產生氣泡，蓋上杯蓋。

4. 啟動電轉儀，設置參數：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此為 BioRad 電轉儀推薦參數，也可按所用 電轉儀 推薦的參數操作），將電擊杯快速放入電轉槽中，電擊完成快速插入冰中。-CMbio-
5. 2 分鐘后從冰中取出電擊杯，放室溫，加入 1ml 不含抗生素的無菌 S.O.C. 培養基（室溫），用 1ml 槍吹吸電擊杯 底部數次混勻后，轉移到 50 ml 離心管（BD Falcon 50 ml 錐形離心管等），向離心管中 補加 S.O.C. 培養基至 10 ml。 傾斜 45 度放入搖床，37℃，225 rpm 復蘇 60 分鐘。-CMbio-
6. 5000 rpm 離心一分鐘收菌，重懸后取 100-200 μl 涂布到含相應抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量較大， 若全部涂 板請選用直徑 15cm 培養皿 2-5 個）。將平板倒置放于 37℃培養箱過夜培養 13-17 小時。-CMbio

*0 電轉化感受態注意事項：
1.  加入 DNA 時體積不應大于感受態體積的 1/10。 -CMbio-

2. 電擊感受態細胞加入電擊杯應避免產生氣泡，氣泡會增加弧光放電風險。-CMbio-

3. 當 DNA 不純或存在鹽，乙醇，蛋白及緩沖液等污染時，轉化效率急劇下降。-CMbio-

4. 電擊杯里的離子可增加溶液的電導，增大在含有細胞和 DNA 的溶液中產生電流和弧光放電的風險。

5. 若轉化大質粒或想獲得較高轉化效率，推薦使用高純質粒提取試劑盒提取質粒。質粒增大一倍，轉化效率下降一個 數量級。-CMbio-
6. 對于連接產物轉化，轉化前乙醇沉淀 DNA 后用適量 TE 緩沖液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重懸產 物，保證 DNA 濃度不超過 100 ng/μl。過高濃度連接產物或過大體積連接產物會降低轉化效率，增加弧光放電的風險。 7. 混入質粒時應輕柔操作，吸取感受態細胞時避免用力過猛，以免剪切力過大損傷細胞膜，降低轉化效率。轉化高濃

度的質粒或連接產物可相應減少終用于涂板的菌量。-CMbio-

8. 電擊感受態細胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期儲存會導致轉化效率會下降。-CMbio-
 *0 電轉化感受態細胞其他推薦：
DH5α感受態細胞 *0感受態細胞 *0F′ 感受態細胞 Mach1-T1感受態細胞 T1感受態細胞 JM109感受態細胞 JM110感受態細胞 XL1-Blue感受態細胞XL2-Blue感受態細胞 DB3.1感受態細胞 Stbl2感受態細胞 Stbl3感受態細胞 XL10-Gold感受態細胞 TG1感受態細胞 HB101感受態細胞 SURE感受態細胞 DH10B感受態細胞 DH10Bac感受態細胞 BJ5183感受態細胞BJ5183-AD-1感受態細胞 Stable感受態細胞 Turbo感受態細胞 F-DH5α感受態細胞 F-*0感受態細胞 DH5a 電轉化感受態細胞 *0 電轉化感受態細胞 SURE 電轉化感受態細胞  BJ5183 電轉化感受態細胞 BJ5183-AD-1 電轉化感受態細胞 DH10B 電轉化感受態細胞 XL1-Blue 電轉化感受態細胞 stable 電轉化感受態細胞 TG1 電轉化感受態細胞EPI400感受態細胞 EPI400 電轉化感受態細胞 BL21感受態細胞 BL21(DE3)感受態細胞 BL21(DE3)pLysS感受態細胞 BL21(AI)感受態細胞 BL21 Star(DE3)感受態細胞 BL21-Star(DE3)pLysS感受態細胞 BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態細胞 Rosetta(DE3)感受態細胞Rosetta-gami(DE3)pLysS Chemically Competent Cell Rosetta-gami B(DE3)感受態細胞Rosetta-gami 2(DE3)感受態細胞 OrigamiB(DE3)感受態細胞 TB1感受態細胞 OverExpress C43(DE3)感受態細胞 Tuner(DE3)感受態細胞 ER2566感受態細胞 F-BL21(DE3)感受態細胞GV3101感受態細胞 EHA105感受態細胞 AGL1感受態細胞 LBA4404感受態細胞 EHA101感受態細胞 GV3101 電轉化感受態細胞 EHA105 電轉化感受態細胞 AGL1 電轉化感受態細胞LBA4404 電轉化感受態細胞 EHA101 電轉化感受態細胞 Y1HGold感受態細胞 Y2HGold感受態細胞 AH109感受態細胞 Y187感受態細胞 EGY48感受態細胞 NMY51感受態細胞
 

  上海淳麥生物科技有限公司專注于感受態細胞、質粒、載體、農桿菌、酵母等生命科學領域的產品研發和技術服務支持。 
上海淳麥生物科技有限公司在感受態細胞的研發方面，實力雄厚，擁有了克隆、表達、酵母和農桿菌4大類，共計百余種感受態細胞。在電擊感受態方面，擁有了大腸桿菌和農桿菌電擊感受態種類，極大提高了客戶在轉基因以及文庫構建方面的成功率。