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技術文章

乙型腦炎病毒IGG抗體檢測試劑盒說明書

閱讀:717          發布時間:2019-7-24

乙型腦炎病毒IGG抗體檢測試劑盒說明書

廣州健侖生物科技有限公司

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【產品名稱】:乙型腦炎病毒IGG抗體檢測試劑盒說明書

【原理】

    日本腦炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)是流行性乙型腦炎(簡稱乙腦)的病原體。乙腦是嚴重威脅人畜健康的一種急性傳染病,可引起母豬流產、死胎、早產,病死率高。豬感染JEV病毒后,在血清中能檢測到特異性抗體。因此檢測特異性豬乙腦抗體,可作為豬場乙腦疫苗的免疫監測及該病輔助檢測指標。

    本試劑盒采用ELISA方法檢測豬血清中的特異性抗體。本試劑盒靈敏度高,特異性強,重復性好,操作方便快速,可分多次使用。

【試劑組成】

1.預包被板

48T/96T;

 

7. 終止液(6號液)

1支;

2.酶結合物(1號液)

1支;

 

8. 陽性對照品

1支;

3.濃縮洗滌液(2號液)

1支;

 

9. 陰性對照品

1支;

4.底物(3號液)

1支;

 

10.不干膠膜

1/2片;

5.顯色劑(4號液)

1支;

 

11.自封袋

1個;

6.樣本稀釋液(5號液)

1支;

 

12.使用說明書

1份;



【操作程序】

1.洗滌液配制 用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液(2號液)按1:10稀釋,如取50ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水充分混勻即為工作洗滌液。

2.樣本稀釋   用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清樣本按1:100稀釋,如取5ul樣本與495ul樣本稀釋液,混勻。陰性、陽性對照品不用稀釋,直接加樣。

3.加樣反應   每次試驗設陰性對照2孔、陽性及空白對照各1孔(分別加入陰性、陽性對照及樣本稀釋液100ul)。樣本檢測孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應30分鐘后,甩去孔內液體,每孔注滿工作洗滌液洗滌3次,每次均需停留1分鐘后再甩凈,拍干。

4. 加酶反應   除空白對照孔外,每孔加酶結合物(1號液) 1滴。37℃避光反應30分鐘后,甩去孔內液體,如上洗滌,拍干。

5.顯色反應   加底物液(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴,混勻,37℃避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴,終止反應(加終止液后,藍色會變為黃色)并判讀結果。

【結果判斷】

    陰性對照呈無色或淺黃色,陽性對照呈明顯黃色,表示試驗有效。

    以空白對照調零,用酶標儀于450nm(630nm作參比波長)讀取吸光度(A值)。待檢孔A值大于陰性對照A值平均值的2.1倍者判為陽性。如陰性對照A值的平均值低于0.08時按0.08計算。

【注意事項】

1.試劑盒于2-8℃保存,有效期6個月。每次使用前應先平衡至室溫。

2.未使用完的板條應密封保存。

3.試劑盒中終止液具有腐蝕性,要小心使用。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗樣本應為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應視為傳染源妥善處理。

6. 37℃孵育時,建議使用水浴箱。如無條件,可在溫箱中放置濕盒進行反應并同時用不干膠膜封蓋板孔。

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