DiI-Ac-LDL DiI標記乙酰化低密度脂蛋白

• 英文名稱 : DiI-Ac-LDL
• 儲存條件 : 2-8℃避光保存，請勿冷凍
• 純度 : 98%
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DiI-Ac-LDL DiI標記乙酰化低密度脂蛋白

DiI-Ac-LDL，即1,1’-雙十八酯基-3,3,3,,3,四甲基-吲哚碳菁高氯酸鹽標記的乙酰化低密度脂蛋白。它能用于鑒定和分離混合細胞群中的血管內皮細胞和巨噬細胞。當細胞被DiI-Ac-LDL標記后，脂蛋白就會被溶酶體酶降解并且DiI（熒光探針）會積累在細胞內膜中。標記了DiI-Ac-LDL的細胞生存活性不受影響。血管內皮細胞純化培養物可以基于增加的代謝DiI-Ac-LDL利用熒光激活分類從復雜的初級培養物中進行分離。污染細胞（成纖維細胞、平滑肌細胞、周細胞、上皮細胞）將不會被標記。巨噬細胞能夠從混合的細胞群中（包括血管內壁細胞）區分出來是因為它的標記更亮一些。

      標記有DiI-Ac-LDL的內皮細胞較其它抗原標記的內皮細胞有較多的優勢。一旦細胞被標記， 熒光探針(DiI)將不會被胰蛋白酶移除掉。低密度和匯合培養的血管內皮細胞都將被高效的標記。其它類型的細胞標記水平均達不到血管內皮細胞標記（除了巨噬細胞）。索萊寶公司DiI-Ac-LDL均通過牛主動脈內皮細胞和小鼠巨噬細胞進行標記測驗以確保結果的*性。

實驗步驟：

      1. 在生長培養基中將DiI-Ac-LDL稀釋至20-50ug/ml；

      2. 將其加入到細胞中37 ºC溫育4小時；

      3. 去掉培養基；

      4. 用無探針的緩沖液沖洗；

      5. 通過熒光顯微鏡觀察并/或者將細胞通過胰蛋白酶（或者EDTA）進行分類。

      6. 熒光顯微鏡：用標準羅丹明激發進行觀察 （或者建議用波長激發：549nm、發射：565nm）。如果需要，用3%甲醛在PBS中固定。切勿使用甲醇或丙酮進行固定，因為DiI溶于有機溶劑。（僅供科研使用）

注意事項：

      長時間的儲存后可能會產生沉淀，這種現象屬于正常情況。溶液放入離心管中離心2分鐘將沉淀除去即可。DiI-Ac-LDL不穩定，實驗時最hao現用現配，采用新鮮配置工作液。