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氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)

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更新時間:2024-11-20 10:10:37瀏覽次數:1422

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產品簡介

供貨周期 現貨 應用領域 環保,化工,生物產業,綜合
氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)
英文名稱 : OX-LDL 儲存條件 : 2-8℃保存,切勿凍存!有效期為6周 單位 : 瓶

詳細介紹

氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)

人源性低密度脂蛋白(通過超速離心分離(1.019-1.063g/cc)純化)在PBS溶液中用5μM Cu2SO4 (氧化劑)37℃ 氧化 20 小時所得。最終通過加入過量EDTA-Na2終止氧化反應。通過瓊脂糖凝膠電泳對不同的LDL的遷移率進行分析。氧化型LDL的遷移速度是普通LDL的2倍。這種氧化型的LDL被廣泛用于研究類脂化合物代謝作用,但細胞凋亡誘導實驗除外。細胞凋亡誘導可選本公司所產高氧化程度低密度脂蛋白進行實驗。

氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)

濃度: 2.0mg/ml(蛋白質)

包裝: 經膜過濾后在PH為7.4,含有1μM EDTA-Na2的PBS溶液中無菌保存;

來源: 銅離子氧化人源血漿LDL;

稀釋方式:PBS磷酸鹽緩沖液或細胞培養液;

注意事項:長時間的儲存后可能會產生沉淀,這種現象屬于正常情況。將溶液放入離心管中離心2分鐘將聚合物除去即可。氧化型LDL不穩定,實驗時最hao現用現配,采用新鮮配置工作液。

慢病毒感染快速指南

1. 將目的細胞按 30%匯合度接種到 24 孔板,約 3-5×104細胞數/孔,不同細胞因為細胞大小不同細胞數量會不同,快速指南以細胞數量為 5×104為例,加入 500uL wan全培養基進行細胞培養。

2. 接種后 12-20h 感染陰性對照慢病毒(接種細胞至病毒感染細胞時間不宜太長,否則細胞增殖影響細胞密度不利用后期抗性篩選)。

3.加病毒量計算方法:(細胞數×MOI /病毒滴度)×103=病毒量(uL),加病毒量見下表。同時加入 Polybrene,每孔加 0.25uL,濃度為 10mg/mL Polybrene,細胞培養液中終濃度為5ug/mL

4.感染 16-20h 后更換培養基,棄去培養基,每孔加入 500uL 新鮮的培養基。

5.感染后 48-96h 顯微鏡觀察熒光。(注:如果 48h-96h 期間細胞匯合度達到 100%,請及時傳代培養)。

6.建議將 48 孔板細胞進行傳代,傳代 12 孔板,后繼續觀察熒光,根據細胞狀態和熒光細胞比例綜合判斷細胞感染最佳 MOI 值。一般選擇細胞生長良好,感染效率 80%左右的感染條件作為最佳感染條件。(注:100%熒光感染不一定為細胞最佳 MOI 值,因為可能會造成細胞慢病毒感染拷貝數太高,影響細胞狀態。



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