8
13365216078
當前位置：首頁>>技術中心>>技術文章>>在使用超濾離心管時您所需要注意的事項分析
在線溝通：
唐蘇強 （銷售經理）
- 電話：
- 手機：
- 13365216078
- 售后電話：
- 13365216078
- 傳真：
- 聯系我時，
- 告知來自化工儀器網
- 個性化：
- www.lvmengyq.com
- 手機站：
- m.lvmengyq.com
- 公司網站：
- http://www.gmhplc.com/
在使用超濾離心管時您所需要注意的事項分析
閱讀：2634發布時間：2020-3-3
新買來的超濾離心管是干燥的，使用前加入超純水，水量*過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂的白線為準。操作要輕，加入蛋白液前，需要插在冰上預冷。
不同離心機的轉速rpm換算成g之后，有所不同。離心機的加速度調至低檔，減小對膜的壓力。注意，一定要等離心機達到目的轉速之后，方可離開離心機，否則離心機出問題時，無法快速處理。膜與轉軸的方向根據說明書調整。在實際使用中，一般轉速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。
當濃縮到剩下1ml時，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍色，以此判斷超濾離心管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測，繼續加入剩下的蛋白液濃縮，直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉淀，導致堵管。若發生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾離心管同時超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發生沉淀為止。
前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer，再濃縮至1ml左右，連續三次，后一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達到1000倍以上，基本上可以達到換buffer的目的。
江蘇綠盟科學儀器有限公司主營產品：泵保護過濾器-溶劑抽濾瓶-固相萃取儀裝置
化工儀器網 設計制作，未經允許翻錄必究.Copyright(C) http://www.zjmenchuan.com, All rights reserved.
以上信息由企業自行提供，信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責，化工儀器網對此不承擔任何保證責任。 溫馨提示：為規避購買風險，建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。
