隨著化妝品市場的蓬勃發展，我國已成為第二大化妝品消費市場，近年來，為提高交易量，很多不法商販在配方中加入激素類藥物，從而在短時間內達到皮膚滑嫩，增加皮膚彈性以及祛痘除皺的效果，然而長期使用該產品會導致皮膚產生黑斑，甚至還可能產生激素依賴性皮炎，我國《化妝品安全技術規范》（2015版）中明確規定抗感染類藥物、抗雄性激素物質、糖皮質激素類、雌激素類、孕激素類、具有雄性激素效應的物質為化妝品組分中的禁用物質，對國家藥監局網站五年內發布的不合格化妝品中非法添加情況進行統計，結果顯示非法添加的激素類藥物多種多樣，含量范圍廣，為確保化妝品安全使用、保障使用者的身體健康，對化妝品中激素類物質的檢測具有重要意義。

本文使用譜育科技的超高效液相色譜—三重四極桿串聯質譜儀建立了檢測化妝品中的63種激素類藥物的方法，該方法檢測速度快且靈敏度高，可用于進行化妝品中激素類藥物檢測。

實驗部分

試樣、標準品、試劑和設備

      試樣：某品牌護手霜。

      標準品：63種激素類藥物混合標準品購自阿爾塔，于-20℃冰箱保存。

      試劑：乙腈為色譜級。

      儀器：ULC 510超高效液相色譜儀（具體配有二元超高壓輸液泵、超高壓自動進樣器、柱溫箱）、EXPEC 5210三重四極桿串聯質譜儀。

液相和質譜條件

樣品前處理

      稱取樣品0.2 g（精確到0.001g），置于10 mL具塞比色管中，加入少量乙腈，在渦旋混合儀上振蕩30s至試樣與提取溶劑混合均勻，然后加入乙腈至近刻度，超聲提取20 min，靜置至室溫，用乙腈定容至刻度，搖勻，以4000 r/min離心10 min，濾過（必要時取上清液適量用50%乙腈溶液稀釋，稀釋液經0.22 μm濾膜過濾），濾液作為待測溶液。

線性

      使用空白基質稀釋激素類藥物混合標準品儲備液，配制濃度為0.5 μg/L、1 μg/L、2 μg/L、5 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L的標準溶液，按照上述方法進樣，以特征離子質量色譜峰面積為縱坐標，對應標準溶液濃度為橫坐標，采用外標法擬合標準曲線，空白基質色譜圖如圖1所示，0.5 μg/L的標準品色譜圖如圖2所示，各化合物線性相關系數r均大于0.995，線性良好。

圖1 空白基質色譜圖

圖2 0.5 μg/L的激素類藥物標準品色譜圖

檢測限和定量限

      配置濃度為0.5 μg/L濃度標準溶液進樣，按照S/N=10和S/N=3計算定量限和檢出限，結果如表2所示，各化合物檢測限在0.0002 μg/g ~0.0036μg/g，定量限在0.0006 μg/g ~0.0119 μg/g。

回收率

      2 μg/L濃度下，各激素類藥物的回收率在75.25%~97.97%，20 μg/L濃度下，各激素類藥物的回收率在80.16%~104.14%，50 μg/L濃度下，各激素類藥物的回收率在90.40%~112.26%。

樣品分析

      分別取三份樣品進行樣品前處理，按以上方法測定，平行進樣3次，樣品中激素類藥物色譜圖如圖4所示，激素類藥物含量如下表所示，結果表明，樣品中沒有63種激素類藥物存在。

圖4 樣品中63種激素色譜圖

結語

      本文建立了一種使用EXPEC 5210三重四極桿液質聯用儀測定化妝品中激素類藥物的方法。63種激素類藥物在0.5 μg/L ~100 μg/L濃度范圍內線性相關系數大于0.995，線性良好；對濃度為1μg/L、10μg/L、100g/L的標準工作液連續測定6次，各種激素類藥物的保留時間相對標準偏差在0.02%~0.17%，峰面積相對標準偏差在1.65%~6.21%,計算濃度相對標準偏差在1.66%~4.99%，精密度良好；經檢測和計算，使用該方法，各種激素類藥物的檢測限在0.004 ~0.02μg/g，定量限在0.006~0.012 μg/g；激素類藥物在2 μg/L、20 μg/L、50 μg/L濃度水平的回收率在75.25%~112.26%之間。使用該方法進行實際樣品測試，表明應試品牌護手霜中不含63種激素。以上結果表明，該方法靈敏度較高，可以快速、準確地檢測化妝品中63種激素的含量。

附錄

設備與耗材方案

一、EXPEC 5210 ESI離子源配置詳情