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活動內容:
購買1瓶賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基(規格:500mL)或1袋賽多培®增強型LB預混培養基(規格:10L),送2瓶大腸桿菌專用破菌液(規格:500mL)或1支甘油菌株(規格:0.5mL, TOP10、DH5a、Bl21(DE3)任選一種)
注:1. 活動日期:截止到2025年3月31日;
2. 終端與經銷活動一致;
3. 本活動最終解釋權歸賽爾瑞成(北京)生命科學技術有限公司所有。
一、賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基
賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基是賽爾瑞成研發的一種適合于大腸桿菌生長和蛋白表達的即用型全成分培養基。使用該培養基,只需一步操作,無需添加IPTG誘導劑,即可收獲含表達蛋白的菌體,與常規方法相比,對絕大多數蛋白表達,其菌體生物量和對應的目的蛋白都明顯提高數倍以上。
☆ 產品優勢
1. 操作簡單,提高效率
直接挑取單菌落或用甘油菌接種,一步操作,然后培養過夜或培養至平臺期收菌,中間不用監測生長狀態(監測OD值),不用添加誘導劑。節省人力和儀器設備。
2. 全成分,即用型
全成分配方,支持大腸桿菌長時間生長和蛋白持續表達,不含潛在有毒有害物質(如IPTG)。
3. 菌體收獲量大,蛋白產率高
與常規誘導表達(LB培養基或2YT培養基,IPTG誘導)相比,對于絕大多數蛋白表達系統,無論是培養相同的時間還是都培養至菌體生長平臺期,用賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基所收獲的菌體生物量以及對應的目的蛋白產量都明顯增高,最高可達數倍以上。
4. 適用范圍廣
1)可適用于大腸桿菌各種以IPTG為誘導劑的載體,包括lac啟動子載體,tac啟動子載體以及T7啟動子載體等,如pGEX系列載體(GST融合載體),pET系列載體等常用載體;
2)既適用于低溫表達(如18°C,22°C或25°C),也適用30°C和37°C表達;
3)既適用于可溶表達,也適用于包涵體表達。
☆ 蛋白表達情況對比
賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基與普通LB培養基(IPTG常規誘導)培養過夜后蛋白表達對比:
培養條件:30°C,200rpm;
LB培養基誘導條件:OD600=1.0加IPTG終濃度為1mM,繼續培養過夜(約20小時)。
注: 1: LB培養基IPTG誘導 2: 賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基
賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基與普通LB培養基(IPTG常規誘導)培養終了時蛋白表達對比:
培養條件:30°C,200rpm;
LB培養基誘導條件:OD600=1.0加IPTG終濃度為1mM,繼續培養至平臺期(約22-24小時);
賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基培養至平臺期約40-48小時。
注: 1: LB培養基IPTG誘導 2: 賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基
產品目錄
貨號 | 產品名稱 | 規格 | 目錄價格 |
PR0101 | 賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基 | 500 mL | 465 |
PR010-5L | 5L | 4100 | |
PR010-10L | 10L | 6970 |
二、賽多培®增強型LB預混培養基
傳統LB培養基是一種普通的細菌基礎培養基,它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl,其中酵母提取物為微生物提供碳源和能源,磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供無機鹽。賽多培®增強型LB預混培養基是賽爾瑞成在傳統LB培養基的基礎上改良而來,能夠較傳統LB培養基大大提高菌體密度,提高目的蛋白表達量數倍。
使用賽多培®增強型LB預混培養基進行大腸桿菌培養時,流程與傳統LB培養基使用方法一致,與“賽多培®大腸桿菌高密度表達培養基”有所區別的是,賽多培®增強型LB預混培養基仍需添加IPTG進行目標蛋白的誘導表達。
☆ 應用案例
1. 大腸桿菌DH5α培養對比結果
以1: 1000比例轉種過夜活化菌至新鮮培養基,37°C,180rpm培養:
2. 大腸桿菌BL21(DE3)培養對比結果
以含有質粒pET21a-O的BL21(DE3)為測試菌種(該菌種表達蛋白O)。以1: 1000比例轉種過夜活化菌至新鮮培養基(含相應抗生素),37°C,180rpm培養:
3. 大腸桿菌BL21(DE3)/pET21a-O誘導表達培養對比結果
以含有質粒pET21a-O的BL21(DE3)為測試菌種(該菌種表達蛋白O)。以1: 1000比例轉種過夜活化菌至新鮮培養基(含相應抗生素),37°C,180rpm培養,至OD600=1時,加入IPTG(終濃度1mM)誘導表達外源蛋白,繼續37°C培養:
結論:在本次培養基和誘導表達條件下,O蛋白在賽多培®增強型LB預混培養基中的表達總量明顯高于傳統LB培養基。
產品目錄
貨號 | 產品名稱 | 規格 | 目錄價格 |
PR0301 | 賽多培®增強型LB預混培養基 | 500 mL | 85 |
PR0302 | 10L | 640 | |
PR0303 | 10×10L | 2760 |
三、大腸桿菌專用破菌液
☆ 產品優勢
1. 節省成本
只需將菌體與破菌液簡單混勻,然后凍融即可,不需要超聲儀就能使菌體破碎,釋放可溶上清。節省儀器成本和人力成本。
2. 組成成分溫和
不含還原劑、強變性劑、離子型去污劑等烈性成分,對絕大多數蛋白結構和活性無影響。
3. 可用于高通量篩選工程菌
原位破菌,篩選成本更低,適用于各種型號培養板(如96孔板、48孔板、6孔板等)。
4. 使用搭配靈活
可搭配賽爾瑞成超級核酸酶(貨號:CR1001),降解菌體裂解后的核酸,以降低破菌液粘度,以利于后續操作;也可以根據需要添加蛋白酶抑制劑、還原劑、NaCl等成分。
☆ 數據對比
注: 1:大腸桿菌專用破菌液破菌上清 2:大腸桿菌專用破菌液破菌沉
3:超聲破菌破菌上清 4:超聲破菌破菌沉淀
M:蛋白Marker
產品目錄
貨號 | 產品名稱 | 規格 | 目錄價格 |
PR0202 | 大腸桿菌專用破菌液 | 500 mL | 126 |
四、大腸桿菌菌株
產品目錄
貨號 | 產品名稱 | 規格 | 目錄價格 |
PB0101 | DH5α甘油菌 | 0.5 mL | 550 |
PB0201 | TOP1甘油菌 | 0.5 mL | 550 |
PB0111 | BL21(DE3) 甘油菌 | 0.5 mL | 550 |