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重組人GDF3試劑盒具有的三種特性:
靈敏度:最小的GDF-3 檢測濃度小于30pg/ml。特異性:可同時檢測重組或天然的人GDF-3。不與人其它細胞因子有交叉反應。重復性:板內、板見變異系數均小于10%。
重組人GDF3其要求有哪些:
1. 生物活性:進行相應的體外或體內活性檢測。
2. 純度:應用兩種方法分析產品純度。
3. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。
4. 內毒素:kinetic LAL法檢測內毒素。
5. 蛋白含量:通過紫外光譜分析,電泳檢測;必要時應用HPLC定量標準蛋白溶液。
6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經過濾除菌處理。
重組人GDF3檢測流程:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入第一抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗處反應15分鐘。
8. 每孔加入100ul終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。