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液相色譜質譜聯用儀分析動物源食品中 30 種鎮靜劑的殘留量
閱讀：172 發布時間：2024-11-20摘要本文介紹了一種結合使用 Captiva EMR-Lipid 與 6495 LC-MS/MS，簡單、高效地檢測多種動物源基質中 30 種鎮靜劑殘留量的方法。在 0.1–200 ng/mL 的濃度范圍內，所檢測的 30 種鎮靜劑的相關系數均高于 0.99，表明該方法具有良好的線性。在豬肉、牛肉、羊肉、雞肉、豬肝和牛奶基質中方法定量限為 1 μg/kg，檢測限為 0.5 μg/kg，在豬腎基質中，方法定量限為 2 μg/kg，檢出限為 1 μg/kg。在加標濃度為 1–10 μg/kg 時，除亞砜的回收率在不同基質中差異較大外，其余化合物的平均加標回收率和相對標準偏差分別在 60.8%–119.6% 和 0.5%–9.9% 之間，準確度和精密度良好。
前言鎮靜劑類藥物通過抑制中樞神經系統活動而達到鎮靜的作用，可用于精神治療，并在畜禽生產中用于動物高密度養殖、長途運輸等，以促進動物生長或緩解運輸應激[1]。然而，此類藥物的濫用會導致藥物殘留在動物體內并發生蓄積，通過食物鏈進入人體后，可能對人體健康產生一系列不良副作用。GB 31650-2019[2]規定，僅允許使用治療劑量，但在動物源性食品中不得檢出；2020 年，農業農村部第 250 號公告《食品動物中禁止使用的藥品及其他化合物清單》[3] 中明確禁止使用。現行有效的動物源性食品中鎮靜劑類藥物殘留檢測標準[4-5] 涉及的藥物種類仍不夠全面，且前處理方法復雜繁瑣。本應用選擇30 種常用的鎮靜劑藥物，使用 Captiva EMR-Lipid 高效去脂并結合高靈敏度 6495 LC-MS/MS，建立了一種準確、高效地同時檢測多種動物源基質中的鎮靜劑類藥物殘留的方法。
實驗部分試劑和樣品標準品： 標準品和溶液配制分別取適量標準品，用甲醇分別配制得到濃度為 1 mg/mL 的單標儲備液；然后取適量單標儲備液，用甲醇稀釋為 10 μg/mL 的混標標準工作液，儲藏于 -20 °C 冰箱中備用。基質校準標樣的配制：分別準確移取上述適量混標標準工作液，使用空白基質溶液稀釋為濃度分別為 0.1（豬腎基質為 0.2）、0.5、1、5、50、100、200 ng/mL 的標準溶液，然后上機檢測。
樣品前處理稱取基質樣品，加入甲酸乙腈提取；經鹽析分層后，取上清液加一定量水，過 Captiva EMR-Lipid 凈化除脂；然后使用 AgilentPoroshell 120 EC-C18 色譜柱結合 6495 LC-MS/MS 進行測定。圖 1 顯示了詳細的樣品前處理操作流程。
質譜條件質譜： Agilent 6495 三重四極桿質譜系統離子源模式：ESI (+)干燥氣溫度：250 °C干燥氣流速：11 L/min鞘氣溫度： 400 °C鞘氣流速： 12 L/min霧化氣壓力：35 psi毛細管電壓：3500 (+)掃描模式： MRM（具體參數見表 1）
結果與討論標準曲線與線性以空白基質提取液為稀釋溶劑，以目標物定量離子的響應為縱坐標，以上述基質校準標樣濃度為橫坐標，繪制基質標準曲線。各目標物的線性回歸方程和相關系數（以牛肉舉例）見表 2。從表中可以看出，在 0.1–200 ng/mL 的濃度范圍內，以外標法定量，牛肉基質中所有目標化合物的標準曲線的相關系數均大于 0.99，表明該方法具有良好的線性。