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前言：方法開(kāi)發(fā)和驗(yàn)證用于證明所有新儀器在現(xiàn)有儀器的操作范圍和可接受標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)，能夠提供相同的結(jié)果。將方法從一臺(tái)儀器轉(zhuǎn)移至另一臺(tái)儀器時(shí)，驗(yàn)證要求取決于 GMP 指南，來(lái)確保結(jié)果的一致性和重現(xiàn)性。本研究展示了在使用紫外-可見(jiàn) ChemStation 軟件的 Cary 8454 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)與使用 Cary WinUV 軟件的 Cary 60 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)之間的方法轉(zhuǎn)移。同時(shí)通過(guò)對(duì)比證明了兩種分光光度計(jì)系統(tǒng)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。方法的任何其他驗(yàn)證要求均需要滿(mǎn)足法規(guī)指南和可接受標(biāo)準(zhǔn)。

實(shí)驗(yàn)部分設(shè)備： – Cary 8454 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) – 紫外-可見(jiàn) ChemStation 軟件 – Cary 60 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) – Cary WinUV 軟件試劑 – 空白溶液： 0.00 mg/L 高氯酸空白 – 標(biāo)準(zhǔn)溶液： 40 mg/L、80 mg/L 和 120 mg/L 重鉻酸鉀 – 樣品溶液： 約 75 mg/L 重鉻酸鉀第 1 部分：確定分析波長(zhǎng)使用 40 mg/L 的重鉻酸鉀樣品確定合適的波長(zhǎng)，并使用 Cary 8454 和 Cary 60 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)在該波長(zhǎng)下生成校準(zhǔn)曲線。儀器參數(shù)：Cary 8454 – ChemStation 軟件： 標(biāo)準(zhǔn)模式，光譜/峰任務(wù) – 波長(zhǎng)顯示： 200–800 nm – 積分時(shí)間： 0.5 秒 – 峰/峰谷查找： 查找并標(biāo)注多兩個(gè)峰儀器參數(shù)：Cary 60 – WinUV 軟件： “掃描”應(yīng)用程序 – 波長(zhǎng)顯示： 200–800 nm – 掃描速度： 高級(jí)設(shè)置：數(shù)據(jù)間隔 3 nm – 基線： 所選校正 – 峰信息： 峰閾值 0.010，X 標(biāo)注（圖 1）

方法開(kāi)啟 Cary 8454 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，將燈預(yù)熱一小時(shí)。在預(yù)熱過(guò)程中，打開(kāi)紫外-可見(jiàn) ChemStation 軟件，選擇“標(biāo)準(zhǔn)模式”進(jìn)行分析并輸入?yún)?shù)。預(yù)熱后，使用高氯酸空白進(jìn)行空白讀數(shù)。使用 40 mg/L 高氯酸溶液采集單個(gè)光譜，從而確定分析波長(zhǎng)。 Cary 60 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)不需要預(yù)熱。打開(kāi) Cary WinUV 軟件，選擇“掃描”應(yīng)用程序并輸入?yún)?shù)。使用高氯酸空白進(jìn)行基線采集，然后采集 40 mg/L 重鉻酸鉀溶液的掃描結(jié)果。結(jié)果在 Cary 8454 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)和 Cary 60 分光光度計(jì)上采集的重鉻酸鉀譜圖具有高度重現(xiàn)性，且在 257 nm 和 350 nm 處鑒定出了相同的峰（圖 2a 和 2b）。

 

結(jié)論 Cary 8454 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)和 Cary 60 系統(tǒng)均分析快速且簡(jiǎn)單易用。如本研究所示，兩種系統(tǒng)均有可輕松進(jìn)行方法開(kāi)發(fā)的軟件，能夠?qū)崿F(xiàn)常規(guī)紫外-可見(jiàn)方法的快速設(shè)置。從 Cary 8454 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)到 Cary 60 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的兩種方法的轉(zhuǎn)移結(jié)果證明，可實(shí)現(xiàn)重現(xiàn)性峰采集以及準(zhǔn)確的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品測(cè)定。本研究分析結(jié)果表明，Cary 60 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（也支持可選的 21 CFR Part 11 軟件工具）的性能，可確保法規(guī)監(jiān)管實(shí)驗(yàn)室在使用 Cary 60 執(zhí)行之前為 8453 或 8454 儀器開(kāi)發(fā)的方法時(shí)充滿(mǎn)信心。