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產品貨號 | 產品名稱 | 規格 |
6760603R | AlphaScreen GST Detection Kit | GST 50K PTS |
這款試劑盒可應用于:
蛋白質 - 蛋白質相互作用分析;
蛋白質 - 多肽相互作用分析;
GST 標記蛋白的檢測和定量;
蛋白質表達;
結合活性研究。
在典型的 AlphaScreen®分析中,感興趣的生物分子被化并與鏈霉親和素包被的供體珠子結合。另一種生物分子帶有 GST 標簽,并與 AlphaScreen® 抗 GST 受體珠子結合。如果這兩種生物分子相互結合,供體和受體珠子就會靠近。激發供體珠子會導致單線態氧的釋放,單線態氧擴散并在受體珠子靠近時觸發其發光。光的量與相互作用的程度成正比。使用試劑盒中提供的化 GST 探針也可以進行競爭形式的分析。
AlphaScreen® 和 AlphaLISA™是基于珠子的分析技術,用于以微孔板形式研究生物分子相互作用。首字母縮略詞 “Alpha" 代表放大的發光鄰近均相分析。顧名思義,這些技術的一些關鍵特征為它們是非放射性的均相分析。捕獲在珠子上的分子結合會導致能量從一個珠子轉移到另一個珠子,最終產生發光/熒光信號。要理解信號是如何產生的,必須首先了解珠子。AlphaScreen® 和 AlphaLISA™分析需要兩種珠子類型:供體珠子和受體珠子。每種珠子類型都含有不同的專有的化學混合物,這是 AlphaScreen® 技術的關鍵要素。供體珠子含有光敏劑酞菁,在680nm 光照下,它將環境中的氧氣轉化為激發態和活性形式的 O2,即單線態氧。請注意,單線態氧不是自由基;它是具有單個激發電子的分子氧。像其他激發分子一樣,單線態氧在回到基態之前具有有限的壽命。在其 4 微秒的半衰期內,單線態氧在溶液中可以擴散約 200 納米。如果受體珠子在這個鄰近范圍內,能量就會從單線態氧轉移到受體珠子內的噻嗯衍生物中,隨后在 520 - 620nm(AlphaScreen)或 615nm(AlphaLISA)處產生光。在沒有受體珠子的情況下,單線態氧回到基態,不會產生信號。這種依賴于鄰近度的化學能量轉移是 AlphaScreen 均相性質的基礎。