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【技術(shù)前沿】全能核酸酶:破解重組蛋白表達(dá)中的“粘稠”難題

2025-2-13  閱讀(131)

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在重組蛋白藥物的研發(fā)與生產(chǎn)中,“高純度、高活性"是核心目標(biāo)。然而,宿主細(xì)胞裂解后釋放的海量核酸(DNA/RNA)卻成了攔路虎——它們讓溶液粘如膠水,堵塞濾膜,污染層析柱,甚至影響終產(chǎn)物的穩(wěn)定性和安全性。如何高效清除這些“隱形干擾者"? 全能核酸酶憑借其du特的“全能降解"能力,正在成為生物制藥領(lǐng)域的明星工具!

一、宿主細(xì)胞核酸:重組蛋白生產(chǎn)的“甜蜜煩惱"

重組蛋白表達(dá)過(guò)程中,無(wú)論是大腸桿菌、CHO細(xì)胞還是酵母系統(tǒng),裂解后都會(huì)釋放大量宿主核酸:

? 溶液粘度飆升:核酸纏繞形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),導(dǎo)致過(guò)濾困難、離心耗時(shí)長(zhǎng);

? 純化效率下降:核酸與目標(biāo)蛋白競(jìng)爭(zhēng)層析介質(zhì)結(jié)合位點(diǎn),降低得率;

? 終產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn):殘留核酸可能引發(fā)免疫原性,影響藥物安全性。

傳統(tǒng)方法(如鹽析、超聲破碎)效果有限,而全能核酸酶的出現(xiàn),讓這些問(wèn)題迎刃而解!

二、全能核酸酶:核酸清除的“全能戰(zhàn)士"

全能核酸酶是一種源自粘質(zhì)沙雷氏菌的重組酶,擁有“一酶雙殺"的超能力:

  • 廣譜降解:無(wú)差別切割所有形式的DNA和RNA(單鏈、雙鏈、線(xiàn)狀、環(huán)狀);

  • 高效作用:極低濃度(1-10 U/mL)即可快速降低溶液粘度;

  • 靈活適配:在pH 6-10、溫度0-42°C范圍內(nèi)保持活性,兼容多種緩沖體系;

  • 安全無(wú)憂(yōu):酶自身可通過(guò)后續(xù)純化步驟(如離子交換層析)wan全去除,無(wú)殘留風(fēng)險(xiǎn)。

三、四大應(yīng)用場(chǎng)景,賦能高效生產(chǎn)

  1. 細(xì)胞裂解液澄清
    添加全能核酸酶后,溶液粘度降低90%以上,顯著提升離心/過(guò)濾效率,縮短工藝時(shí)間。
    案例:某單抗生產(chǎn)中使用全能核酸酶,澄清步驟時(shí)間從8小時(shí)縮短至1.5小時(shí),濾膜消耗成本減少60%。

  2. 層析柱保護(hù)者
    預(yù)清除核酸可防止層析介質(zhì)堵塞,延長(zhǎng)填料壽命,提升蛋白捕獲率20%-30%。

  3. 高純度蛋白“護(hù)航員"
    核酸去除后,目標(biāo)蛋白與雜質(zhì)分離更徹di,HCP(宿主細(xì)胞蛋白)殘留降低,純度可達(dá)99%以上。

  4. 內(nèi)毒素控制

核酸易吸附內(nèi)毒素,清除核酸可同步降低內(nèi)毒素水平,符合《中國(guó)藥典》注射級(jí)蛋白標(biāo)準(zhǔn)。

從“粘稠困境"到“清澈見(jiàn)底",全能核酸酶以科學(xué)之力,為重組蛋白表達(dá)開(kāi)辟了一條高效、經(jīng)濟(jì)的純化之路。無(wú)論是工藝開(kāi)發(fā)新手還是規(guī)模化生產(chǎn)專(zhuān)家,掌握這一利器,都將讓您的蛋白藥物更具競(jìng)爭(zhēng)力!

逐典生物依托重組蛋白定向改造平臺(tái),基于AI酶進(jìn)化能力,成功開(kāi)發(fā)多款全能核酸酶,酶活性高,終產(chǎn)物回收率高,能夠特異性適配不同應(yīng)用場(chǎng)景,在病毒純化、疫苗生產(chǎn)、蛋白和多糖類(lèi)制藥工業(yè)作為宿主殘留核酸去除試劑,有效去除宿主殘留核酸,保證生物制品功效及安全性。

產(chǎn)品特點(diǎn)

  1. 高酶活性:中、高鹽緩沖液條件下,酶活性高

  2. 高回收率:高鹽環(huán)境下減少核酸纏繞病毒或目的蛋白,降低AAV等病毒顆粒聚集,提高目的產(chǎn)物回收率

  3. 高工藝簡(jiǎn)便性:下游收獲或純化無(wú)需超濾換液或透析脫鹽

性能驗(yàn)證數(shù)據(jù)

  • Pannarase全能核酸酶




圖1.Pannarase全能核酸酶酶切數(shù)據(jù)

  • Pannarase耐高鹽全能核酸酶
    Pannarase在150 mM Na+濃度條件下酶活性最高,300 mM時(shí)仍有36.2%的活性




圖2.Pannarase耐高鹽全能核酸酶耐鹽曲線(xiàn)




圖3.Pannarase耐高鹽全能核酸酶酶切數(shù)據(jù)

  • Pannarase耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型

Pannarase耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型在600~700 mM Na+濃度條件下酶活性最高

圖4.Pannarase耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型耐鹽曲線(xiàn)


圖5.Pannarase耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型酶切數(shù)據(jù)

產(chǎn)品推薦

產(chǎn)品名稱(chēng)產(chǎn)品規(guī)格產(chǎn)品貨號(hào)
Pannarase全能核酸酶100,000UCYG002F0010
Pannarase全能核酸酶500,000UCYG002F0050
Pannarase全能核酸酶5,000,000UCYG002F0500
Pannarase全能核酸酶100,000UCY002F0010
Pannarase全能核酸酶500,000UCY002F0050
Pannarase耐高鹽全能核酸酶100,000UCYG006F0010
Pannarase耐高鹽全能核酸酶500,000UCYG006F0050
Pannarase耐高鹽全能核酸酶5,000,000UCYG006F0500
耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型100,000UCYG070F0010
耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型500,000UCYG070F0050
耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型5,000,000UCYG070F0500


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