目前,包括單抗、雙抗、多抗治療性蛋白藥物已成為生物制藥市場的主導產品類別之一。在制備這些治療性蛋白藥物時,單細胞克隆技術的應用對于確保產品質量的一致性和避免人為干預至關重要。通過有限稀釋進行單細胞篩選耗時且低效,傳統FACS技術昂貴的設備及人員培訓又筑起了一道高門檻。
阿斯利康對比了傳統FACS與Namocell單細胞分離儀Pala, 結果表明與FACS衍生細胞系相比,Pala具有相當甚至更優的細胞生長和生產能力,且操作簡單,運行/維護成本低,可以作為替代FACS更具性價比,高效便捷的選擇。
01
試驗方法
1
將轉染后的細胞進行熒光標記,通過FACS和單細胞分離儀Pala將單細胞分離至384孔板中
2
對分配后的細胞進行成像和克隆生長評估,以確定單細胞克隆的成功率。
3
通過小規模補料分批培養評估不同克隆來源的細胞系的生長特性和生產能力。
02
研究結果
1
Pala 的單細胞分離效率高達96.3%,細胞活率高,生長2周后無空孔
2
在易于表達的單克隆抗體和不易于表達的非單克隆抗體模型中,對于生長狀況和產量滴度來說,FACS和Pala無明顯差異。
3
在兩種模型中,無論是滴度、Qp、分裂速率、最大細胞密度、活率均無明顯差異。
4
Pala與FACS相比,機器小巧輕便可放置在安全柜中,易于無菌操作。開機校準時間短、關機流程簡單迅速、鞘液消耗更少、耗材成本低、易于終端用戶操作、儀器維護成本更低。
單細胞分離儀Pala結合微流控技術、流式細胞術和液滴分配技術,在<2psi的低壓下對細胞進行分選,可分別在1分鐘和6分鐘內將細胞分選到96或384孔板中。在節省大量分選時間的同時獲得健康且有活力的細胞。
Pala保證了較高的單細胞效率,單細胞入孔率超過90%。自動化設計使得操作簡單直觀,不需要專門的操作人員和大量的應用培訓。小巧輕便的設計允許其可以在超凈臺內完成操作,一次性細胞芯片避免了樣本間的交叉污染。
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