2023年1月29日，美國Harutyun Khachatryan研究團隊在Biomolecules雜志發(fā)表了文章Identifification of Inhibitors of Tubulin Polymerization Using a CRISPR-Edited Cell Line with Endogenous Fluorescent Tagging of β-Tubulin and Histone H1，提出了一種新的方法來識別微管蛋白聚合抑制劑，利用內(nèi)源性熒光標記β-微管蛋白和組蛋白H1的CRISPR - Hela細胞系來鑒定微管蛋白聚合抑制劑。該方法有助于研究活細胞內(nèi)源性蛋白，而不使用細胞固定、免疫染色或重組蛋白過表達。

本研究使用β-微管蛋白（mCTover3）、組蛋白H1（mTagBFP2）和p62-SQSTM1（mRuby3）熒光蛋白， 用CRISPR和FAST-HDR載體系統(tǒng)開發(fā)HeLa細胞，采用Hana單細胞分離儀（Namocell）進行單細胞分選，使用綠色熒光通道，并分選到96孔板中進行單細胞克隆培養(yǎng)，然后選擇一個具有均勻明亮β-微管蛋白熒光的細胞克隆大量擴增得到實驗細胞。

后續(xù)實驗通過高內(nèi)涵成像分析來動態(tài)觀察微管蛋白聚合情況。用已知的微管蛋白聚合抑制劑、秋水仙堿和長春新堿處理此細胞，并證實了由此產(chǎn)生的微管蛋白聚合抑制的表型變化。此外，作者篩選了429個激酶抑制劑文庫，鑒定出三種抑制微管蛋白聚合的化合物（ON-01910、HMN-214和KX2-391）。

值得注意的是，研究中采用Namocell 單細胞分離儀幫助作者快速、輕柔、高效地獲得活性高的CRISPR - Hela單細胞，利于單克隆培養(yǎng)及擴增，為后續(xù)更多實驗提供足夠的細胞工具。

• 輕 柔 - 壓力小于 2psi，保護細胞活性

• 快 速 - 分選快（1min），初始化快（2min），樣本切換快（1min）

• 精 準 - 配備 2-11 色熒光通道，精準捕獲目的細胞

• 無 菌 - 一次性無菌芯片，隔絕樣本污染

• 輕 松 - 無需調(diào)校，開機即用

• 輕 巧 - 體積小巧，方便搬動

   

    Namocell 是一家成立于美國硅谷的專注于單細胞分選技術(shù)的生物儀器公司，2022年7月加入Bio-Techne。公司自主研發(fā)的微流控單細胞分選平臺，使復雜的單細胞分選變得極其簡單快速，極大地推動了單細胞分析在基礎研究和臨床上的應用。我們的單細胞分選儀已在細胞株的構(gòu)建，單克隆抗體的篩選，細胞基因編輯，基因及細胞治療，癌癥液體活檢，癌癥免疫治療，產(chǎn)前基因篩查，噬菌體展示，單細胞基因組學等多方面得到廣泛的應用。目前Namocell微流控單細胞分選儀已經(jīng)被世界各大研究機構(gòu)及生物制藥公司廣泛應用于生命科學研究的各個領(lǐng)域，例如美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)，美國食品藥品監(jiān)督管理局 (FDA)，美國疾病控制與預防中心(CDC)，哈佛大學，斯坦福大學，麻省理工大學，Genentech，Merck，Biogen，BMS，Janssen，Boehringer-Ingelheim等。