單細胞鋪板是將一個孔加入少量無血清培養基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底。
單細胞鋪板的好壞決定了后續實驗的成敗，這個實驗看似簡單，其實也不是那么好做，其中關鍵是要鋪得均勻鋪得平整，其中的操作蘊含著豐富技巧。
要鋪出一個好的板子，必須要做到一下幾點：
1、單細胞重懸
貼壁細胞培養完成后需要將細胞消化收集，并獲得單細胞懸液，但這時候即便消化下來也會連在一起了。這時我們需要注意：消化細胞需要選擇適用的消化液、適當的消化溫度和時間；消化后需要輕輕拍打細胞貼壁面，震落細胞；少量培養基重懸，并用移液器反復吹散細胞。做到這幾點后獲得細胞懸液基本是單細胞懸液。
2、一步完成
獲得細胞懸液后要先根據選擇的培養板的種類，以及要種的細胞密度調整細胞懸液的濃度，可在離心管中調整后反復顛倒搖勻，種板需要一步完成，切不可先加細胞后補液或先加液再補細胞。
3、十字搖勻
細胞種板后將懸液鋪滿整個底面，為防止來回走動導致細胞局部不均勻，放置細胞培養箱內做十字搖勻，搖勻后就不能再移動，直到細胞貼壁方可。
單細胞鋪板需要做到細胞均勻分布，密度適中。正確的鋪板需要獲得單細胞懸液，正確地調整密度，一步到位種植到培養板，通過十字搖法使細胞均勻分布。
