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2020-12-9 閱讀(1046)
His-Tag標記可與多種金屬離子發(fā)生特殊的相互作用,包括Ca2+、Mg2+、Ni2+、Co2+等,其中以鎳離子使用較為廣泛。
在重組蛋白末端融合多個組氨酸成串的肽段(常用6個組氨酸)。憑借此組氨酸肽段與二價金屬離子(鎳、鋅等)的螯合作用,便于用金屬螯合親和層析純化蛋白質(zhì)。也可以用針對組氨酸肽段的抗體來檢測該融合蛋白。6個組氨酸的肽段可簡寫為6×His。
His-tag:組氨酸標簽(Histidine-tag),基因工程構建的純化標記通行的標記之一,是在蛋白zhuan質(zhì)的氨基端加上6~shu10個組氨酸,在一般或變性條件(如8M尿素)下借助它能與Ni2+螯合柱緊緊結合的能力,用咪唑洗脫,或將pH降至5.9使組氨酸充分質(zhì)子化,不再與結合Ni2+使之得以純化。