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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質生物學>>蛋白提取和裂解>> 神經元蛋白提取試劑盒

神經元蛋白提取試劑盒
  • 神經元蛋白提取試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 貝博生物
  • 型號
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地
屬性

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更新時間:2025-05-10 17:41:23瀏覽次數:155評價

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產品概述 product description 貝博® BBproExtra® 神經元蛋白提取試劑盒適用于從動物神經元細胞中提取總蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時內完成。 本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細胞膜組份,包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。能有效提取神經微管的表面蛋白。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。 本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。 本試劑盒中不含有EDTA,與金屬螯和層析等下游應用兼容。
保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
WB,IP等
適用樣本
動物神經元
產品特點
1、 使用方便。
2、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
3、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
4、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性。
產品應用
WB,IP等
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
使用注意事項:
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
?
使用方法
1. 提取液制備:
每500 μl冷的總蛋白提取液中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物和2 μl蛋白穩定劑,混勻后置冰上備用。
2. 取1×106個細胞,在4℃,1000×g條件下離心5-10分鐘,小心吸取培養基,盡可能吸干,收集細胞。
3. 用冷PBS洗滌細胞兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每1X106個細胞中加入200 μl冷的蛋白提取液,混勻后,在4℃條件下振蕩20-45分鐘。
5. 在4℃,12000×g條件下離心10分鐘。
6. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即可得到神經元總蛋白。
7. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。
常見問題分析
1.蛋白濃度低?
處理部分組織樣本時可能沒有裂解,導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續振蕩的條件下處理,沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

2. 細胞裂解速度慢?
為了充分保證提取得到的蛋白的活性,提取液采用的保護蛋白的配方,裂解能力溫和,下游應用范圍廣。適當延長裂解的時間即可。

3.用什么方法定量蛋白?
建議用BCA法。不適合用Bradford法,因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份,導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系,則可以用Bradford法定量。

4.提取時出現膠狀沉淀?
蛋白提取液處理產物中有時會出現少量透明膠狀物,屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。不檢測和基因組DNA結合特別緊密的特定蛋白的情況下,可以直接離心取上清進行后續實驗即可;如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理,300w/10秒間隔10秒,超聲3分鐘,隨后離心取上清用于后續實驗。檢測一些常見的轉錄因子,例如NF-kappaB、p53等時,不必進行超聲處理。

5.提取的蛋白具有活性嗎?
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份,不破壞蛋白的結構,沒有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞,蛋白均保持其天然構象和活性。

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