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RIPA裂解液（不含triton x-100）

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品牌 貝博生物
型號
廠商性質 生產商
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更新時間：2025-05-10 15:51:26瀏覽次數：143評價

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產品分類品牌分類

蛋白質生物學

蛋白提取和裂解

細胞器分離

蛋白純化

蛋白質濃縮和緩沖液置換

蛋白定量

蛋白凝膠電泳

免疫組織化學

全部產品列表

貝博生物

產品簡介

產品概述 product description 貝博RIPA裂解液采用優質原料配制，對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用，是經典常用的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等下游實驗。本RIPA裂解液成分為25mM Tris?HCl pH 7.6, 150mM NaCl, 1% NP-40, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS。根據相應實驗要求添加自己需要的蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑。

詳細介紹

保存溫度

2-8℃

注意事項

1.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

1年

檢測方法

WB、IP等

適用樣本

細胞、組織

產品應用

WB、IP等

儀器準備

1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機/勻漿器

試劑準備

1.PBS緩沖液（pH7.4，實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X））（phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
2.蛋白定量試劑盒

耗材準備

? 離心管
? 吸頭
? 一次性手套

使用注意事項

1.實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。
2.整個過程須保持樣品處于低溫狀態。
3.本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
4.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
5.禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
6.使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并清除殘留清潔劑。
7.避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

使用方法

A．細胞裂解
1. 取5-10×106個細胞，在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養基，盡可能吸干，收集細胞。
2. 用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
3. 每5×106個細胞中加入500ul冷的裂解液（每106個細胞，大約10mg或10ul壓積，加100ul RIPA裂解液。大約相當于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一個75 cm2培養瓶加1 ml。裂解液和細胞應充分接觸。如果RIPA裂解液不足量，細胞裂解效率將會降低），混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
4. 在4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。
5. 快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。

B．組織裂解
1. 取100mg組織樣本剪碎，加入1ml裂解液，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
2. 將組織勻漿吸入另一預冷的干凈離心管中，在4℃，10000rpm條件下離心5分鐘。
3. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。

上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存備用。