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4.細胞簡介：

分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經結構，位于脊柱的椎管內且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發出成對的神經，分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形(蝴蝶型)灰質區，主要由神經細胞構成；在灰質區周圍為白質區，主要由有髓神經纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經(稱為脊神經)分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節，31對脊神經就是由不同的脊椎發出的。神經系統基本的結構和功能單位是神經元，即神經細胞，其大小和外觀在中樞神經系統中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體，內含神經絲、微管、內質網、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經元突起的粗面內質網可用Nissl染色顯示，在光鏡下是灰藍色斑塊狀，稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經元的突起，能在神經元之間傳遞電沖動，突起的大小和形態各不相同，很難用常規的顯微鏡鑒別。脊髓組織內含有大量膠質細胞，神經元含量少，分離純化難度大，且脊髓神經元細胞是高度分化的終末細胞，不能分裂增殖，培養要求高。剛接種的脊髓神經元呈圓形，體積小，透亮，無突起。培養2-3d，可見胞體增大，突起增多延長；培養6-7d，細胞體大飽滿，突起明顯增加延長并交織成網，光暈明顯，立體感強。培養20d后，死亡細胞明顯增加，細胞出現內空泡，突起粗細不均，甚至脫壁，發生細胞崩解。

5.方法簡介：

實驗室分離的采用膠原 - 胰聯合消化法、神經元專用培養基培養篩選結合化學試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

實驗室分離的經元細胞經β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

培養基  含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    每2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  神經元細胞樣

傳代特性  屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液  0.125%胰dan白

培養條件  氣相：空氣，95%；CO2，5%

操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告：

Kelch樣蛋白3抗體　非受體性蛋白酪氨激ETK封閉多肽　人乳腺癌標志物CA15-3(CA15-3)ELISA試劑盒

肉毒堿棕櫚酰基轉移1A抗體　環指蛋白27封閉多肽　人乳頭狀瘤病毒抗體試劑盒ELISA

胚胎干細胞關鍵蛋白抗體　醛縮2封閉多肽　人乳頭狀瘤病毒抗體(IgM)ELISA檢測試劑盒

磷化激M2抗體　凋亡相關蛋白5封閉多肽　人乳頭狀瘤病毒抗體(IgG)ELISA試劑盒

英文名稱: Cytokeratin 5　FBXO4蛋白封閉多肽　人乳頭狀瘤病毒18型毒衣殼蛋白L1(HPV18L1)抗體(IgG)試劑盒ELISA

胞漿支鏈氨基轉氨抗體　VAC14蛋白封閉多肽　人乳頭狀瘤病毒18型(HPV18)抗體(IgG)檢測試劑盒elisa

磷化雙皮質抗體　KCNH3蛋白封閉多肽　人乳頭狀瘤病毒16型毒衣殼蛋白L1(HPV16L1)抗體(IgG)ELISA試劑盒

DNA連接3抗體　LANCL3蛋白封閉多肽　人乳頭狀瘤病毒16型(HPV16)抗體(IgM)試劑盒ELISA

英文名稱: ERK2　9號染色體開放閱讀框95封閉多肽　人乳頭狀瘤病毒16型(HPV16)抗體(IgG)ELISA檢測試劑盒

去甲腎上腺轉運蛋白/神經遞質去甲腎上腺轉運體抗體　PDHA2蛋白封閉多肽　人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)抗體(IgG)ELISA試劑盒

英文名稱: Villin　ATP結合轉運因子1封閉多肽　人乳糖凝集8(LGALS8)試劑盒ELISA

細胞色CYP3A1抗體　無精癥缺失基因1封閉多肽　人乳脫氫A(LDHA)檢測試劑盒elisa

細胞色P450Ⅱj3抗體　腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR封閉多肽　人乳清磷核糖轉移(OPRT)ELISA試劑盒

磷化蛋白激樣內質網激抗體　毒蕈堿型乙酰受體M4封閉多肽　人乳過氧化物(LPO)試劑盒ELISA

英文名稱: Calretinin　磷化細胞周期末期促進復合蛋白APC1封閉多肽　瘤抗原1(SAGE1)ELISA檢測試劑盒

磷化相關死亡促進因子抗體　可溶性載質轉運蛋白3A1封閉多肽　堿O-棕櫚酰基轉移1,肝亞型(CPT1A/CPT1)ELISA試劑盒

脊髓小腦失調癥蛋白1抗體　鋅指蛋白651封閉多肽　堿試劑盒ELISA

鋅指蛋白81抗體　泛連接Siah1封閉多肽　毒堿脂酰轉移(CACT)檢測試劑盒elisa
大鼠脊髓神經元細胞U-937人淋巴瘤細胞專用培養基英文名稱：U-937細胞專用培養基500ML

UM-UC-3人膀胱移行癌細胞專用培養基英文名稱：UM-UC-3細胞專用培養基125ML

UM-UC-3人膀胱移行癌細胞專用培養基英文名稱：UM-UC-3細胞專用培養基500ML

VCAP人前列腺癌細胞專用培養基英文名稱：VCAP細胞專用培養基125ML

VCAP人前列腺癌細胞專用培養基英文名稱：VCAP細胞專用培養基500ML

WERI-RB-1人視網膜神經膠質瘤細胞專用培養基英文名稱：WERI-RB-1細胞專用培養基125ML

WERI-RB-1人視網膜神經膠質瘤細胞專用培養基英文名稱：WERI-RB-1細胞專用培養基500ML