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人胃癌組織成纖維細胞

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更新時間:2023-04-23 10:26:27瀏覽次數:264

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 胃癌組織
人胃癌組織成纖維細胞的相關產品:SW579 [SW 579; SW-579] (人甲狀腺鱗癌細胞) (L15) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養瓶大鼠氣管平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養瓶大鼠毛囊細胞5×10?Cells/T25培養瓶人支氣管成纖維細胞5×10?Cells/T25培養瓶COS-7 (非洲綠猴SV40轉化的腎細胞)1×10?cells/T25培養瓶

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人胃癌組織成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

胃癌組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自患有胃癌病人的胃癌組織;胃癌(gastric carcinoma)是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤,在我國各種惡性腫瘤中發病率居,胃癌可發生于胃的任何部位,其中半數以上發生于胃竇部,胃大彎、胃小彎及前后壁均可受累,絕大多數胃癌屬于腺癌。在胃癌侵襲和轉移的過程中,涉及諸多復雜的過程,如細胞外基質的硬化和降解、新生血管的形成等,而這些過程會直接或間接的引起腫瘤微環境(Tumor mircoenvironment)的改變。腫瘤微環境即腫瘤細胞生存的外部環境,由不同種類的非腫瘤性的細胞與細胞外基質(Extracellular matrix,ECM)構成,包括纖維細胞,免疫細胞,內皮細胞,間充質干細胞等,腫瘤細胞通過調控這些間質細胞,創造出有利于自身侵襲轉移的條件,從而使得腫瘤得到進展。越來越多的證據表明,腫瘤微環境的改變在腫瘤進展中扮演著重要的角色。在腫瘤微環境中,研究多也是主要的間質細胞是腫瘤相關成纖維細胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)。CAFs 主要由腫瘤周邊的正常成纖維細胞和成纖維細胞樣細胞演化而來。胃癌組織源成纖維細胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。剛分離的胃癌組織源成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合膠原消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

白細胞介36γ抗體 FRG2B蛋白封閉多肽 

慢性粒細胞白血病33抗體 磷化蛋白酪氨激JAK-2封閉多肽 

抑癌基因結合蛋白ARID1B抗體 重組人程序性死亡1(CD279)蛋白 

蝮蛇巴曲霉毒單克隆抗體 重組腺病毒早期E1A蛋白 

周期D結合蛋白1抗體 BCL2相互作用蛋白質封閉多肽 

長壽相關基因lASS3抗體 重組人G-CSF (活性的, Tag free) 

內皮1抗體 多發性骨髓瘤相關蛋白2封閉多肽 

硫轉移ω1/glutathione S transferase Omega 1抗體 溶質載體家族16成員12封閉多肽 

英文名稱: L-Citrulline 磷化蛋白激MST封閉多肽 

G蛋白激活內流鉀通道蛋白2抗體 CD34封閉多肽 

轉錄因子蛋白SIM2抗體 磷化間變型淋巴瘤激封閉多肽 

英文名稱: COT 節律蛋白2封閉多肽 

5號染色體開放閱讀框20抗體 /2-(甲基氨基)-1-苯基-1--BSA偶聯物 

乳腺珠蛋白1抗體 磷脂蛋白受體Dab1封閉多肽 

磷化表皮生長因子受體抗體 磷化Ets轉錄因子家族ets1封閉多肽 

1號染色體開放閱讀框172抗體 磷化紅細胞生成受體封閉多肽 

HOOK2蛋白抗體 鈣粘附分子10封閉多肽 

英文名稱: phospho-Smad2 (Ser255) 鈣激活鉀通道蛋白 α 1封閉多肽 
人胃癌組織成纖維細胞大鼠皮膚肥大細胞培養基100mL大鼠皮膚肥大細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠皮膚肥大細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠皮膚肥大細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠皮膚肥大細胞的體外培養。

雞氣管上皮細胞培養基100mL雞氣管上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持雞氣管上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含雞氣管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于雞氣管上皮細胞的體外培養。

SF126細胞專用培養基125mL×4SF126細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持SF126細胞佳的生長狀態。本產品中已包含SF126細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SF126細胞的體外培養。

RWPE-2細胞專用培養基125mL×4RWPE-2細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持RWPE-2細胞佳的生長狀態。本產品中已包含RWPE-2細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RWPE-2細胞的體外培養。

COLO 201細胞專用培養基125mL×4COLO 201細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持COLO 201細胞佳的生長狀態。本產品中已包含COLO 201細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于COLO 201細胞的體外培養。

大鼠心肌細胞培養基100mL大鼠心肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠心肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠心肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠心肌細胞的體外培養。

大鼠棕色脂肪干細胞培養基100mL大鼠棕色脂肪干細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠棕色脂肪干細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠棕色脂肪干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠棕色脂肪干細胞的體外培養。

 


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