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大鼠滑膜細胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):317

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產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 滑膜組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠滑膜細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

滑膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關節(jié)腔內面的內襯結構,各種關節(jié)內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構,同時在各種關節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關節(jié)炎(OA)以關節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣鳎洳±砀淖兝奂瓣P節(jié)的各個組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關節(jié)的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的大細胞群體,是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構,它包埋在顆粒狀無定性的基質中,基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細胞)、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹突細胞樣滑膜細胞)細胞組成。滑膜細胞主要功能:①滑膜細胞產生潤滑液成分,并且與關節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關;②滑膜細胞增生,表現(xiàn)為不依賴于支持物生長,并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節(jié)損壞;③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡中效應因子的一部分。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

HMX3蛋白抗體 NFE2相關因子樣蛋白3封閉多肽 

胎盤表達轉錄因子1蛋白抗體 細胞信號轉導分子Smad-1封閉多肽 

遺傳性前列腺癌蛋白2抗體 TRIM66蛋白封閉多肽 

S轉移2抗體 堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉錄因子SCXA封閉多肽 

猴痘病毒A29L抗體 白細胞介28A封閉多肽 

EIF2B2蛋白抗體 SPIRE1蛋白封閉多肽 

跨膜結構域邊緣蛋白CEE抗體 NFKB激活蛋白封閉多肽 

雙特異性磷2抗體 微管相關蛋白封閉多肽 

GADD45G抗體 信號轉導接頭蛋白2封閉多肽 

磷化蛋白激C theta抗體 腺苷受體A3封閉多肽 

磷化核糖體S6激RSK2抗體 去甲腎上腺轉運蛋白/神經(jīng)遞質去甲腎上腺轉運體封閉多肽 

煙堿型乙酰受體ε抗體 急性髓細胞白血病1蛋白封閉多肽 

IL-2誘導型T細胞激抗體 磷化gp130封閉多肽 

促甲狀腺β亞單位抗體 細胞色P450 2D10封閉多肽 

乳腺癌基因刪除蛋白2抗體 G蛋白偶聯(lián)受體108封閉多肽 

電導鈣激活鉀通道蛋白1抗體 核苷交換因子4 

端粒調控因子2抗體 調控周期蛋白依賴蛋白激SEI2封閉多肽 

細胞周期檢測點激2抗體 G蛋白偶聯(lián)受體172B封閉多肽 
大鼠滑膜細胞人口腔黏膜成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

PL45 (人胰腺導管腺癌細胞) DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

K7M2 wt [K7M2-WT] (小鼠骨肉瘤成骨細胞) (種屬鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠腸道干細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

兔主動脈內皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠腦動脈血管平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠主動脈內皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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