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小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):297

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺組織
小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞的相關(guān)產(chǎn)品:人脂肪干細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基100ML人脂肪干細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML大鼠海綿體內(nèi)皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基100ML大鼠海綿體內(nèi)皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML雞骨骼肌細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基100ML

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

肺組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應。細胞呈梭形或多角形,形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細胞構(gòu)成半選擇性屏障,該屏障對于肺氣體交換,調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  內(nèi)皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 Alexa Fluor 750標記鏈霉親和 小鼠解整合樣金屬8(ADAM8)試劑盒 ELISA

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白喉毒B抗體 甲型流感病毒血凝封閉多肽 小鼠胰島細胞抗體(ICA)ELISA Kit
小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞小鼠腦動脈平滑肌細胞英文名稱:小鼠腦動脈平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠神經(jīng)干細胞英文名稱:小鼠神經(jīng)干細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠腦血管成纖維細胞英文名稱:小鼠腦血管成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠DRG神經(jīng)元細胞英文名稱:小鼠DRG神經(jīng)元細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞英文名稱:小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠背根神經(jīng)節(jié)細胞英文名稱:小鼠背根神經(jīng)節(jié)細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞英文名稱:小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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