詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 組織來源 |
人骨髓樹突狀細胞(成熟DC細胞) | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 骨髓 |
商品詳細介紹:
4.細胞簡介:
分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的;樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態不規則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導成的單核細胞,貼壁形態多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經TNFα、LPS等誘導而成,多數呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養也可能導致自發分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導免疫應答,處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節;未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產生免疫應答,不能激活T細胞的第二信號,可導致T細胞無能,從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養過程添加細胞因子誘導而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
實驗室分離的經CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態 圓形,樹突狀
傳代特性 屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰dan白
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
實驗報告:
一、分離與培養: | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; |
磷化17β羥基類固醇脫氫13抗體 甲基化樣蛋白19封閉多肽 人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA試劑盒
頂膜鈉依賴性膽鹽轉運體蛋白抗體 干擾β封閉多肽 人多功能蛋白聚糖(VS)試劑盒ELISA
轉錄因子SOX-11蛋白抗體 垂體瘤轉化蛋白2封閉多肽 人B細胞κ輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA檢測試劑盒
白介2抗體 核孔蛋白Nup37封閉多肽 人ADAM金屬肽含血小板反應蛋白1基元4(ADAMTS4)elisa試劑盒
β3腎上腺能受體抗體 緊密連接蛋白1封閉多肽 人類似RIKENcDNA4933429F08基因試劑盒elisa
11號染色體開放閱讀框16抗體 微管蛋白封閉多肽 人孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)檢測試劑盒elisa
膜粘連蛋白13抗體 封閉多肽 人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒
第10號染色體開放閱讀框27抗體 RNA結合蛋白34封閉多肽 人絲氨抑制因子肽抑制因子進化枝3G(Serpina3g)試劑盒ELISA
英文名稱: MUC2 氯離子通道調節蛋白1A封閉多肽 人類似RIKENcDNAA630077B13基因ELISA檢測試劑盒
金屬離子轉運體1抗體 真核翻譯起始因子4G封閉多肽 人類似RIKENcDNA3110050K21基因elisa試劑盒
雙皮質抗體 磷化Ephrin B封閉多肽 人類似RIKENcDNA2610307008基因試劑盒elisa
自噬微管相關蛋白輕鏈β3抗體 磷化非受體酪氨激c-Abl封閉多肽 人類似RIKENcDNA2010109K09基因檢測試劑盒elisa
陽離子轉運蛋白2抗體 磷化磷脂酰肌醇激調節亞單位gamma封閉多肽 人ras同源物基因家族成員b(RHOB)ELISA試劑盒
細胞色C氧化蛋白6B2抗體 鋅指蛋白589封閉多肽 人假定蛋白LOC677340試劑盒ELISA
英文名稱: Cytokeratin 19 補體4結合蛋白封閉多肽 人假定蛋白LOC433328ELISA檢測試劑盒
CRB2蛋白抗體 ZNF792/鋅指蛋白792封閉多肽 人髓樣分化因子初次應答基因88(MYD88)elisa試劑盒
鈣/鈣調依賴蛋白激2b/2γ抗體 腱調蛋白/軟骨調節樣1蛋白封閉多肽 人干擾活化基因205(Ifi205)試劑盒elisa
妊娠特異性糖蛋白4抗體 活化半胱胺蛋白-3封閉多肽 人組織相容性2-K1-K區(H2-K1)檢測試劑盒elisa
人骨髓樹突狀細胞(成熟DC細胞)panc02小鼠胰腺癌細胞英文名稱:panc021×106DMEM+5%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報告
panc02+LUC小鼠胰腺癌細胞熒光標記英文名稱:panc02+LUC1×106DMEM+5%FBS+1%P/S(panc02鼠源鑒定)報告
PT-67小鼠源基于MLV-10A1逆轉錄病毒包裝細胞系英文名稱:PT-671×106DMEM+10%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報告
RAG小鼠腎腺癌細胞英文名稱:RAG1×106MEM+10%FBS+1%P/S (STR鼠源鑒定)報告
RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞英文名稱:RAW 264.71×106DMEM+10%FBS+1%P/S 不能用消化細胞刮代替,易分化傳代時密度要大(STR鼠源鑒定)報告
RAW 264.7+GFP小鼠單核巨噬細胞白血病細胞+GFP英文名稱:RAW 264.7+GFP1×106DMEM+10%FBS+1%P/S 不能用消化細胞刮代替,易分化傳代時密度要大(提供RAW264.7鑒定)報告
Renca 小鼠腎癌細胞英文名稱:Renca 1×1061640+10%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報告