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人骨髓來源內皮祖細胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數:297

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨髓
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人骨髓來源內皮祖細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

骨髓

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞,亦稱為成血管細胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進一步增殖分化的幼稚內皮細胞,缺乏成熟內皮細胞的特征性表型,不能形成管腔樣結構,其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發生和血管損傷后的修復。研究顯示,內皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創傷愈合等方面均發揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學特性和治療作用的研究成為這一領域新的熱點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  內皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代;不建議多次傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

錨蛋白重復結構域蛋白37抗體 磷化原癌基因c-Raf封閉多肽 

肌球蛋白重鏈6抗體 聚合延伸因子2封閉多肽 

鉀離子通道KCNJ18抗體 8/第八/第八因子相關抗原封閉多肽 

SIKE1蛋白抗體 CD105封閉多肽 

S100A8+A9 Complex單克隆抗體 TOX4蛋白封閉多肽 

SGT1蛋白抗體 FP100蛋白封閉多肽 

英文名稱: IKB epsilon 磷化非受體型酪氨蛋白激封閉多肽 

肝特異性有機陰離子轉運蛋白LST1抗體 BCL10結合蛋白和激活核轉錄因子封閉多肽 

背板膠質乙酰酯抗體 內吞作用輔助蛋白EPN2封閉多肽 

間變型淋巴瘤激抗體 環指蛋白94封閉多肽 

鐵調節蛋白25抗體 突觸后密度蛋白95封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激Nek3抗體 細胞間粘附分子-1封閉多肽 

甲狀腺過氧化物抗體 卷曲螺旋結構域蛋白94封閉多肽 

英文名稱: MMP9 磷化樁蛋白Paxillin封閉多肽 

英文名稱: phospho-Alpha synuclein (Ser129) 22號染色體開放閱讀框13封閉多肽 

抗藥蛋白抗體 磷化粘著斑激封閉多肽 

表皮生長因子受體3抗體 配體依賴核受體共抑制因子樣蛋白封閉多肽 

磷脂爬行3抗體 黑色瘤相關抗原8封閉多肽 
人骨髓來源內皮祖細胞U-2 OS [U2OS]細胞專用培養基125mL×4U-2 OS [U2OS]細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持U-2 OS [U2OS]細胞佳的生長狀態。本產品中已包含U-2 OS [U2OS]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于U-2 OS [U2OS]細胞的體外培養。

HMY-1細胞專用培養基125mL×4HMY-1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持HMY-1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含HMY-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HMY-1細胞的體外培養。

KTC-1細胞專用培養基125mL×4KTC-1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持KTC-1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含KTC-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于KTC-1細胞的體外培養。

P3X63Ag8.653細胞專用培養基125mL×4P3X63Ag8.653細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持P3X63Ag8.653細胞佳的生長狀態。本產品中已包含P3X63Ag8.653細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于P3X63Ag8.653細胞的體外培養。

大鼠食管上皮細胞培養基100mL大鼠食管上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠食管上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠食管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠食管上皮細胞的體外培養。

人角膜內皮細胞培養基100mL人角膜內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人角膜內皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人角膜內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人角膜內皮細胞的體外培養。

大鼠腎皮質上皮細胞培養基100mL大鼠腎皮質上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠腎皮質上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠腎皮質上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠腎皮質上皮細胞的體外培養。


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