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大鼠骨髓間充質干細胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數:307

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨髓
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠骨髓間充質干細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

骨髓

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質系統內存在的骨髓間充質干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細胞總數的0.001%-0.1%,含量極低。骨髓間充質干細胞的體外培養條件要求較高,在培養過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

絨毛膜特異性轉錄因子GCMa抗體 1號染色體開放閱讀框173封閉多肽 人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab) ELISA試劑盒

ATP結合轉運因子2抗體 原癌基因蛋白c-kit封閉多肽 人抗神經元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu) 試劑盒 ELISA

跨膜通道蛋白8抗體 衰變加速因子CD55封閉多肽 人抗DNAB抗體(anti-DNase B) ELISA檢測試劑盒

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian DYDC2蛋白封閉多肽 人抗BP180抗體(BP180-Ab) ELISA Kit

G蛋白偶聯受體109A抗體 細胞色P450 27B1封閉多肽 人抗BB抗體(BB-Ab) ELISA試劑盒

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β淀粉樣蛋白前體蛋白結合蛋白2抗體 舞蹈癥相關蛋白40/8相關蛋白/第八因子相關蛋白封閉多肽 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA Kit

鋅指蛋白142抗體 磷化粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體β封閉多肽 人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒

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胞質緊密粘連蛋白1/閉鎖小帶蛋白1抗體 半胱氨酰白三烯受體2型封閉多肽 人抗內因子抗體(IFA)ELISA檢測試劑盒

磷化HER4抗體 神經激肽A受體/K物質受體封閉多肽 人抗磷脂抗體(Apl/APA)ELISA Kit

β葡萄糖苷3抗體 環指蛋白146封閉多肽 人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒

整合αVβ1抗體 補體因子I輕鏈封閉多肽 人晶體蛋白α(Cryα)試劑盒 ELISA

補體C3cα 鏈片段1抗體 Rad51封閉多肽 人晶體蛋白β(Cryβ) ELISA檢測試劑盒

IGF2基因的互補基因1蛋白抗體 MAL蛋白封閉多肽 人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA Kit

囊泡相關膜蛋白相關蛋白A抗體 肌微管相關蛋白10封閉多肽 人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒

人巨細胞病毒UL49蛋白抗體 多瘤病毒增強了結合蛋白2β封閉多肽 人抗環胍氨肽抗體(CCP)試劑盒 ELISA
大鼠骨髓間充質干細胞人乳腺癌相關成纖維細胞英文名稱:人乳腺癌相關成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人睪丸血管內皮細胞英文名稱:人睪丸血管內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人卵巢微血管內皮細胞英文名稱:人卵巢微血管內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人子宮內膜成纖維細胞英文名稱:人子宮內膜成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人蛻膜成纖維細胞英文名稱:人蛻膜成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人卵巢成纖維細胞英文名稱:人卵巢成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人陰道成纖維細胞英文名稱:人陰道成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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