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技術文章

分析細胞狀態不好原因

閱讀:1151          發布時間:2022-5-18

分析細胞狀態不好原因:

一、胰酶消化過度

在用胰酶消化細胞使其不貼壁的時候,如果消化時間過長,會導致細胞膜表面蛋白也被破話,嚴重者可致細胞破碎、死亡。所以胰酶消化不宜過久。如果消化了好久(具體消化時間視細胞而定)在鏡下看還有很多細胞貼壁,可能是胰酶消化力弱。增強胰酶消化能力的方法:消化前用PBS洗以去除血清中的各種蛋白;在胰酶中加入EDTA;在消化前胰酶37攝氏度預熱。

二、傳代比例太低

細胞在培養基中生長的時候,除了外源營養物質,其自身也會分泌促進生長的物質。如果一個皿中細胞數量太少,細胞分泌的營養物質支撐不了“一大家子"的細胞,細胞狀態就不好。不要因為偷懶而減少傳代比例,以及細胞懸液要吹打均勻讓傳代的細胞就是你要的比例。

三、污染

在(細菌或真菌)污染的早期,還未出現明顯的細胞外形被嚴重破壞、培養基變黃的時候,細胞可能出現大量死亡、形狀怪異、有大團細胞簇擁的現象。這時候你再養一兩天,就能看到細胞變成馬賽克(細菌污染)或者培養基肉眼可見渾濁有絮絮(真菌污染)。





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