化工儀器網
詳細介紹
組織來源：脾臟組織
種屬來源：人
細胞簡介：脾是重要的淋巴器官，有造血、濾血、清除衰老血細胞及參與免疫反應等功能。 也是淋巴細胞遷移和接受抗原刺激后發生免疫應到、產生免疫效應分子的重要場 所。 脾由被膜、小梁、白髓、紅髓、邊緣區幾部分組成。其中的結締組織主要是 由成纖維洗白構成。
培養基：原代成纖維細胞培養體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁培養
細胞形態：長梭形細胞
傳代特性：細胞特性確定傳代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養條件：氣相： 空氣，95%；CO2 ，5%
一、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規格 | 商品貨號 |
人脾成纖維細胞 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | A01X1454 |
二、細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
三、使用方法
人脾成纖維細胞是一種貼壁培養細胞，細胞形態呈長梭形細胞，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；
4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化；
3)經1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內；
4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產品：
人乳腺成纖維細胞 | 人卵巢癌組織源細胞 |
熱休克蛋白-70重組兔單克隆抗體 | 沉默調節相關蛋白2重組兔單克隆抗體 |
人冠狀動脈平滑肌細胞 | 磷化BRD2蛋白重組兔單克隆抗體 |
人呼吸道上皮細胞 | 生長抑制因子1重組兔單克隆抗體 |
人滑膜成纖維細胞 | 類胰蛋白δ1抗體 |
人滑膜細胞 | 細胞角蛋白13重組兔單克隆抗體 |
人甲狀腺癌組織源細胞 | 轉酮醇(轉羥乙醛)抗體(C端) |
人膠質瘤組織源細胞 | 熱休克蛋白27重組兔單克隆抗體 |
人角膜基質細胞 | 磷化組蛋白H2AX重組兔單克隆抗體 |
人角膜內皮細胞 | MYH7B兔單克隆抗體 |
人角膜上皮細胞 | 神經絲蛋白單克隆抗體 |
人結腸癌組織源細胞 | 人脾成纖維細胞原癌基因蛋白/活化蛋白1重組兔單克隆抗體 |
人結腸平滑肌細胞 | 信號轉導和轉錄激活因子2重組兔單克隆抗體 |
人晶狀體上皮細胞 | 蛋白酪氨激JAK-3重組兔單克隆抗體 |
人淋巴管內皮細胞 | 磷脂酰肌醇激（PI3Kβ）重組兔單克隆抗體 |
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網