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培養操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

黃色鐮孢人凝血原Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠apelin 12(AP12)ELISA試劑盒

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鋅指蛋白Zic2抗體黑芝貂肺上皮細胞

鋅指FYVE結構域蛋白27抗體香栓菌小鼠胰島內皮細胞

鋅指蛋白423抗體榆生離褶傘SV40轉染人成骨細胞
PKC抑制劑（NSC305787 hydrochloride）安替比林

其他 安替吡啉；替比林；1,5-二甲基-2-基-3-吡唑啉；非那宗；二基吡唑；2,3-二甲基-1-基-3-吡唑啉-5-

英文名稱： Antipyrine

其他英文名稱： Phenyl dimethylpyrazolone；1,2-Dihydro-1,5-dimethyl-2-phenyl-3H-pyrazol-3-one；2,3-Dimethyl-1-phenyl-3-pyrazolin-5-one

產品規格： CP

包　　裝： 100克/500克

CAS號：60-80-0

C11H12N2O=188.23

級別：CP

熔點：110～113℃

水溶解試驗：合格

水分：≤1.0%

灼燒殘渣：≤0.15%

重金屬：≤0.002%

性狀：片狀結晶或粉末。微有苦味。1G溶于不超過1ml水、1.3ml乙、1ml。水溶液對石蕊呈中性。相對密度(d204)1.19。熔點111～113℃。沸點319℃。低毒,半數致死量(大鼠,經口)1800mG/kG。有刺激性。

用途：生化研究。硝、亞硝及碘的分析試劑。測定能形成絡合陽離子的元(如鉍、錫、銻和汞等)。重量分析測定鈦。

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