詳細介紹
培養操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
AZD5582 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
AZD5582是二聚化Smac mimetics,IAPs抑制劑,對cIAP1,cIAP2和XIAP的IC50值分別為15,21和15nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1258392-53-8 純度:99.47% 分子量:1015.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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堅強芽胞桿菌Bacillus│firmus 質量規格:>98%芝麻林
二聚化Smac mimetics,IAPs抑制劑聚乙二10000
其他 聚氧乙烯10000;聚氧化乙烯10000
英文名稱: PEG10000
其他英文名稱: Polyethylene glycol 10000
產品規格: AR
包裝:250克/20公斤
產品規格: 色固
包裝:100克
CAS號:25322-68-3
分子式:HO(CH2CH2O)nH
級別:AR
平均分子量:9000~12500
pH(50g/L,25℃):4.5~7.5
結晶點:56~63℃
色度(250g/L):≤20 APHA
度:合格
粘度(210°F):1000~1750cSt
級別:色固
相對極性:++++
性狀:或微黃色蠟狀固體或為片狀。溶于水。閃點≥240℃
用途:生化研究。氣相色譜固定液(高使用溫度130℃,溶劑為、、二氯),分離分析、、醛等含氧化合物,聚四氟乙烯中水分,脂肪胺,揮發油。并被廣泛用作載體和毛細管柱內壁的改性劑。有機合成。
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