詳細介紹
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
50次 | FS-P013599 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照), 一個是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒。 | 三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。 11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
Human urease related protein C,UreC ELISA Kit 人尿相關蛋白CMulti-class antibodies: 48T
Slit2/Slil3 神經遷移蛋白Slit2/3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗兔IgG 0.1ml
AQP-0(Mouse Aquaporin 0) ELISA Kit 小鼠通道蛋白0 96T
Neogenin 神經細胞粘附蛋白NGN抗體 0.1ml
Phospho-BMX (Tyr40) 磷化非受體性蛋白酪激ETK抗體 0.1ml
Slit2/Slil3 神經遷移蛋白Slit2/3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
AO(Human Acrine Orange) ELISA Kit 人吖啶橙Multi-class antibodies: 48T
Phospho-PERK (Thr980) 磷化蛋白激樣內質網激抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Histone H3 (Tri Methyl K4) 基化組蛋白H3抗體 0.1ml
cmDNA(Human cell membrane DNA antibody) ELISA Kit 人抗細胞膜DNA抗體 96T
Prion protein PrP 朊病毒/感染性蛋白抗體 0.2ml
Chloramphenicol 霉抗體 0.2ml
Phospho-PERK (Thr980) 磷化蛋白激樣內質網激抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Mouse human IgG(3D3)/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
Galactose kinase 半乳糖激1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ATAD2 三磷腺苷家族蛋白2抗體 0.2ml
HOXc8/FITC 熒光標記同源盒基因的一種抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG-Fc/APC APC標記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
phospho-c-Jun (Ser243) /FITC 熒光標記磷化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬瘟病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒50次淡灰鏈霉菌種屬: Streptomyces│glaucus提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
嗜氣單胞菌嗜亞種種屬: Aeromonas│hydhydrophila subsp.rophila分離基物: tin提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: yes培養基: 348生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
摩爾根氏變形桿菌種屬: Proteus│morganii提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 11 10,13培養基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Bacillussolimangrovi種屬: Bacillussolimangrovi分離基物: 土壤安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃
軸突蛋白2(NRXN2)ELISA試劑盒噻吩-2-硫 97%4-乙氧基乙酮 98%砷試劑,DDTC銀鹽
軸突蛋白1(NRXN1)ELISA試劑盒2,3,5-基吡 99%4-乙炔 98%2,6-二溴酚靛酚鈉
周期依賴性激抑制因子3(CDKN3)ELISA試劑盒對氨基甲 98%3-乙炔 98%鉻黑T
周期依賴性激抑制因子2A(CDKN2A)ELISA試劑盒1-甲基基-2-甲 97%4-乙基聯 97%鉻藍黑R
周期依賴性激8(CDK8)ELISA試劑盒非那西汀 ≥98.0% (HPLC)4-乙基環己酮 98%鉻藍
周期依賴性激7(CDK7)ELISA試劑盒4-氨-3-磺 98%4-乙基乙炔 98%乙二四乙三鹽(EDTA-3K)
周期依賴性激6(CDK6)ELISA試劑盒2-氨基-4--5-磺 98%4-戊基乙炔 97%熒光(IND)
周期依賴性激4(CDK4)ELISA試劑盒對甲 AR,99.0%4-氟乙炔 98%熒光(AR,90%)
周期依賴性激2(CDK2)ELISA試劑盒1-氨基茚滿 98%4-氟 99%試亞鐵靈
周期依賴性激1(CDK1)ELISA試劑盒托品 98%鄰氟 99%鈣紅,乙二縮雙(鄰氨基酚)
重肽鐵蛋白(FTH)ELISA試劑盒6-姜酚 分析標準品,≥98%1-溴-3-氟-4- 99%羥基萘酚藍
腫廇蛋白P63(TP63)ELISA試劑盒 from soybean,>98%3-氟 99%試劑
腫瘤易感基因101(TSG101)ELISA試劑盒 from soybean,>90%4-(4-羥基基)環己酮 97%乙二四乙鋅二鈉 四合物
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)ELISA試劑盒 from soybean,>70%4'-羥基聯基-4-羧 99%石蕊
腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)ELISA試劑盒液體石蠟 CP4-己基聯 98%甲基橙(IND)
腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)ELISA試劑盒液體石蠟 AR4-庚基-4'-基聯 98%甲基紅鈉鹽(IND)
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。