詳細介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
英文名稱:Pyridoclax 產品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 Pyridoclax(MR-29072)是Mcl1高效抑制劑,Kd值為25nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1651890-44-6 別名:MR-29072 分子量:426.51 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
大腸埃希氏菌Arthrobacter sulfonivorans
泡盛曲霉Arthrobacter citreus
Marivirga sp.Arthrobacter nicotinovorans
草青霉Agromyces brachium
異常漢遜酵母Agromyces luteolus
金黃色葡萄球菌金黃亞種Geobacillus stearothermophilus
合適檸檬桿菌Geobacillus stearothermophilus
淡紫擬青霉Lactococcus lactis subsp. cremoris
雜色曲霉Agromyces mediolanus
四脊裸胞殼Delftia acidovorans
根瘤菌Rhodococcus erythropolis
假單胞菌屬Rhodococcus sp.
釀酒酵母Rhodococcus sp.
斑污擬盤多孔孢Rhodococcus sp.
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種Rhodococcus sp.
熱帶假絲酵母Rhodococcus sp.
基質細胞衍生因子-1抗體硝鹽陰性不動桿菌日本絲孢酵母
心肌肌球蛋白抗體α-myosin傷寒沙門氏菌解脂耶羅維亞酵母
細胞因子信號傳導抑制蛋白1抗體咽峽炎鏈球菌金色隱球酵母
Mcl1高效抑制劑(Pyridoclax)L-谷酰胺
其他L-(+)-2-基-5-酰胺;L-麩酰胺;L-谷酰胺;L-羰基丁;L-2-基戊二酰胺;L-谷-5-酰胺;L-谷酰胺;L-酰胺;左谷酰胺
英文名稱:L-Glutamine
其他英文名稱:L-α-Aminoglutamic acid;L-Glutamic acid 5-amide;L-Gln;H-Gln-OH
產品規(guī)格:BR,99%
包裝:25克/100克/500克
CAS號:56-85-9
C5H10N2O3=146.15
級別:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:+6.3~+7.3o
PH:4.0~6.0
干燥失重:≤0.30%
砷鹽:≤1ppm
灼燒殘渣:≤0.30%
重金屬:≤15ppm
性狀:結晶粉末。在中性或弱性沸騰溶液中,迅即轉化為吡咯羧的銨鹽。1G,30℃時溶于20.8ml水中,18℃時溶于38.5ml水中,0℃時溶于56.7ml水中,幾乎不溶于甲、乙、、、和乙乙酯。熔點185~186℃(分解)。
用途:生化研究。培養(yǎng)基
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