詳細介紹
培養操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
CH5132799 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
CH5132799是I型PI3K選擇性抑制劑,對PI3Kα,PI3Kβ,PI3Kδ和PI3Kγ的IC50分別為0.014,0.12,0.50和0.36uM,對II和III型PI3k以及mTOR的抑制性較低。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1007207-67-1 純度:98.01% 分子量:377.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
枯草芽孢桿菌Janibacter sp.
總狀毛霉Janibacter sp.
金黃桿菌屬Janibacter sp.
冠突曲霉Rhodococcus sp.
稻生擲孢酵母Rhodococcus sp.
我孫子市鞘菌Planococcus sp.
大腸埃希氏菌Planococcus sp.
斜臥青霉Rhodococcus sp.
鉛黃腸球菌Rhodococcus sp.
細鏈格孢Janibacter sp.
鏈霉菌Halobiforma haloterrestris
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)*Exiguobacterium aurantiacum
假單胞菌Pseudomonas flavescens
馬杜拉放線菌Exiguobacterium aestuarii
紅平菇Exiguobacterium marinum
酵母Pseudomonas citronellolis
: F631資源名稱: 鏈格孢 質量規格:>98%,DNMT抑制劑
優雅食烷菌Alcanivorax│venustensis 質量規格:含量測定
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:>98%,TLR7/TLR8激動劑
I型PI3K抑制劑(CH5132799)L-甘-甘-白三肽
其他甘酰-甘酰-L-亮
英文名稱:Gly-Gly-Len
其他英文名稱:Glycylglycyl-L-leucine
產品規格:BR,98%
包裝:1克/5克/25克
CAS號:14857-82-0
C10H19N3O4=245.28
級別:BR
含量:≥98.0%
比旋光度:-18.5~-19.5°
熔點:188~192℃
鑒別:呈正反應
鐵鹽:≤10ppm
重金屬:≤10ppm
砷鹽:≤1ppm
干燥失重:≤0.50%
灼燒殘渣:≤0.10%
性狀:結晶粉末
用途:生化研究
保存:RT