詳細介紹
培養操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Nampt-IN-1 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
LSN3154567是一種新型NAMPT抑制劑,作用于NCI-H1155,Calu-6,HCC1937,和MCF-7細胞,IC50值分別為18nM,49nM,333nM,和389nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1698878-14-6 純度:98.99% 分子量:419.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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核突觸蛋白相互作用蛋白1抗體阿普利亞小單孢菌豬布魯氏菌 生物Ⅱ型
NAMPT抑制劑(Nampt-IN-1)L-組鹽鹽一水物
其他鹽組;L-氫氯組一水物
英文名稱:H-His-OH.HCl
其他英文名稱:L-α-Amino-β-(4-imidazolyl)propionic acid monohydrochloride;L-Histidine Hydrochloride Monohydrate;L-Histidine monohydrate monohydrochloride
產品規格:BR,99%
包裝:25克/100克/500克
CAS號:5934-29-2
C6H9N3O2•HCl•H2O=209.63
級別:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:+8.5o~+10.5o
鉛:≤5ppm
干燥失重:≤0.30%
灼燒殘渣:≤0.10%
性狀:結晶或結晶性粉末,無臭,稍苦味。易溶于甲,溶于水,不溶于乙
用途:生化研究。組織胺(histamine)的前體物質,依靠組脫羧(histidine decarboxylase)
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